Implicancias de las vías linfática y sanguínea en la entrada de neutrófilos a ganglios linfáticos en un modelo de inflamación inmune.

CAROLINA GORLINO; ROMINA RANOCCHIA; GABRIEL MORÓN; BELKYS MALETTO; MARÍA C PISTORESI- PALENCIA.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LVII Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología

Cuando ratones BALB/c son inmunizados s.c. con OVA más CFA (animales OVA/CFA) e inyectados con OVA-FITC en la almohadilla plantar se produce un influjo de neutrófilos OVA-FITC+ (Ne/OVA-FITC+) en los ganglios linfáticos drenantes (LN). El objetivo de este trabajo fue determinar el rol de las vías linfática y/o sanguínea en la entrada de Ne/OVA+ a los LN de animales OVA/CFA. El análisis por inmunofluorescencia de cortes histológicos de LN de animales OVA/CFA, obtenidos 6 horas después de la inyección en la pata con OVA-FITC, permitió observar la presencia de Ne/OVA-FITC+ en la luz de vasos linfáticos (LYVE-1+) y en la luz de vénulas del endotelio alto (MECA-79+). Para confirmar que Ne/OVA+ migran desde la piel hacia LN utilizando la vía linfática se realizaron experimentos de transferencia adoptiva. Para ello, Ne de médula ósea de animales normales fueron incubados in vitro con complejos inmunes (ICs: suero inmune de conejo anti OVA y OVA) o sin ICs y marcados con CFSE. Luego, se los inyectó en la pata izquierda de animales OVA/CFA o normales  (la derecha recibió PBS) y 90 minutos después se extrajeron LN. Los resultados obtenidos por citometría de flujo en animales OVA/CFA fueron: LN izquierdo (Ne+ICs):0,4±0,1%, LN derecho (PBS):0,08±0,01% (p<0,05); Ne sin ICs:0,07±0,01%, PBS: 0,035±0,003% (p<0,05 Ne sin ICs vs Ne+ICs) y en animales normales: LN  (Ne+ICs):0,005±0,003% (p<0,01 animales normales vs animales OVA/CFA).   Para corroborar la implicancia de la vía endovenosa, se realizaron similares experimentos de transferencia pero inyectando i.v. Ne/DiIC(18)-DS+. Los resultados en animales OVA/CFA fueron: Ne+ICs:1,0±0,2%; Ne sin ICs:0,31±0,06% (p<0,05); y en animales normales: Ne+ICs:0,030±0,006% (p<0,001 animales normales vs animales OVA/CFA). Estos resultados demuestran que en nuestro modelo experimental los Ne llegan por vía linfática y por vía sanguínea a LN y que esta migración es dependiente de ICs y de la presencia de un estado inflamatorio.