CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Extracto etanólico de raíz de ?diente de león? afecta la proliferación, supervivencia y migración de líneas celulares infectadas con virus papiloma humano
Autor/es:
MARÍA L MUGAS; SUSANA NUÑEZ MONTOYA; RAÚL FERNANDO VENEZUELA; ANA X KIGUEN; BRENDA KONIGHEIM; RACHEL ACLAND; JESSICA P MOSMANN; CECILIA G CUFFINI
Lugar:
Valle Hermoso
Reunión:
Congreso; XXXVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología (SAV); 2018
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
La variedad limitada de quimioterapia para las lesiones causadas por el virus del papiloma humano (VPH), desde las verrugas hasta el cáncer de cuello uterino (CaCu) hace necesaria la búsqueda de nuevos compuestos para tratar estas lesiones. En tal sentido Taraxacum officinale G. Weber ex F.H. Wigg (?diente de león?) mostró en estudios previos, diversas bioactividades, en líneas celulares de leucemia y melanoma. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos sobre la proliferación, supervivencia y migración de un extracto de raíz de T. officinale, sobre líneas celulares infectadas con virus papiloma humano. Se obtuvo el extracto etanólico (R-EtOH) a partir de raíces de T. Officinale por extracción en Soxhlet. Se utilizaron líneas celulares de CaCu infectadas con HPV 16 y 18 (CaSki y HeLa), células CaCu sin HPV (C33A) y queratinocitos inmortalizados (HaCaT, control). La citotoxicidad se evaluó por medio de la reducción de MTT, incubando las células con 15 concentraciones diferentes de R-EtOH (10-1000 μg/ml), durante 48 hs. A partir de este ensayo se obtuvieron las concentraciones efectivas 80 [CE80] y 50 [CE50], las cuales fueron utilizadas para la realización de los ensayos posteriores. Para evaluar la capacidad de las células para crecer y formar una colonia después de la exposición a R-EtOH, se realizó el ensayo clonogénico. La respuesta apoptótica se observó luego de 24 hs de exposición a R-EtOH, utilizando el ensayo de TUNEL por microscopia, mientras que la medición de Anexina V y 7-AAD se realizó por citometría de flujo (CF). El efecto sobre la migración celular fue evaluado mediante un ensayo de cicatrización de heridas exponiendo las diferentes líneas celulares a R-EtOH [CE80] durante 24 hsEl extracto de R-EtOH mostró un efecto citotóxico dependiente de la dosis en todas las líneas celulares, siendo mayor en las células C33A, CaSki y HeLa, en comparación con HaCaT. Diferentes concentraciones de R-EtOH disminuyeron el número y el tamaño de las colonias en todas las líneas celulares, con el siguiente orden de susceptibilidad C33A> HeLa> CaSki> HaCaT. El aumento en la concentración de R-EtOH (CE80 hasta CE50) se tradujo en un mayor porcentaje de células en apoptosis en el ensayo de Tunel y un aumento de las células positivas a Anexina V y 7-AAD en la CF, principalmente en células de CaCu. El ensayo de cicatrización de heridas mostró que R-EtOH [CE80], inhibe eficazmente la migración celular en comparación con las células no tratadas.Nuestros resultados sugieren que el extracto de R-EtOH contiene componentes bioactivos que afectan la proliferación, supervivencia y migración celular con una mayor selectividad a las células de CaCu. Por lo tanto, consideramos importante continuar explorando los componentes de R-EtOH como una posible fuente de nuevos quimioterapéuticos para tratar las infecciones provocadas por el virus del papiloma humano.