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La aplicación de plaguicidas, productos intrínsecamente tóxicos desarrollados para blancos biológicos selectivos, tiene el potencial de exponer a otros organismos y contaminar matrices ambientales (aire, suelo y agua), afectando la salud pública y el ambiente. En los entornos ocupacionales, la exposición a plaguicidas es múltiple y compleja, involucrando variables como el tipo de producto, su toxicidad, la cantidad utilizada, la duración y frecuencia de la exposición, el ambiente y la organización del trabajo. En ese aspecto, en el marco de la línea de investigación en la que se inserta el presente trabajo, se realizaron estudios observacionales en la población cordobesa de aplicadores de plaguicidas. Los resultados de los mismos indicaron una alta prevalencia de síntomas y de consultas médicas y hospitalización relacionadas al uso ocupacional de agrotóxicos, poniendo en evidencia la existencia de un complejo escenario de riesgo.El objetivo de este trabajo fue evaluar la presencia de plaguicidas de uso frecuente en muestras de plasma y orina de sujetos agroaplicadores y en un grupo control. La determinación de plaguicidas en las muestras biológicas se realizó mediante extracción en fase sólida, seguida de purificación con columnas de flujo turbulento en línea con el análisis mediante cromatografía de líquidos-espectrometría de masas en tándem. Se optimizó la metodología para la evaluación de 24 plaguicidas de uso frecuente en muestras de plasma y orina, consiguiendo parámetros de calidad analítica acorde a normas internacionales (Decisión 2002/657/EC). Los resultados mostraron una mayor frecuencia de detección de plaguicidas en sujetos expuestos que en los sujetos control. El grupo de sujetos expuestos evidenció la presencia de 13 plaguicidas: picloram, imidacloprid, metsulfuronmetil, clorotoluron, 2-4 D, atrazina, diclosulam, cyproconazole, azoxystrobina, cletodin, metolaclor y carbendazim. En cambio, el grupo de sujetos control mostró resultados positivos a estos dos últimos plaguicidas: metolaclor y carbendazim, además de clorpirifós, el cual no se detectó en individuos expuestos. Esta diferencia evidencia la mayor exposición de los sujetos expuestos en relación a los sujetos control. La evaluación de residuos de plaguicidas en muestras biológicas de agroaplicadores permitió confirmar la exposición a dichos compuestos, mostrando la necesidad de realizar acciones para mejorar el entorno laboral.