Efecto de NO2-OA sobre el estrés oxidativo y la reactividad glial en células gliales de Müller

SUBIRADA PV; BONACCI GA; VAGLIENTI, V; PAZ MC; RIDANO, ME; SANCHEZ, MC; BARCELONA PF

CORDOBA

Congreso; AIVO 2018 (XIII Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología); 2018

Las retinopatías proliferativas se encuentran entre las principales causas de ceguera irreversible. La patogénesis de la retinopatía diabética es multifacética, incluyendo cambios proinflamatorios, estrés oxidativo y nitrosativo, entro otros. Cambios metabólicos generados durante la diabetes alteran la barrera hemato-retinal, permitiendo la extravasación de proteínas plasmáticas como α2-macroglobulina (α2M), la cual es un inhibidor de proteinasas con capacidad de unir factores de crecimiento y citoquinas en el espacio extracelular. Trabajos previos de nuestro grupo han demostrado que α2M induce incremento en los niveles proteicos de GFAP en células gliales de Müller (CGM). En los últimos años ha sido demostrado que los ácidos grasos-nitrados (NO2-FA), tienen propiedades antiinflamatorias y citoprotectivas, mediadas por la activación de la vía antioxidante Keap1-Nrf2, entre otras. Estos antecedentes los convierte en moléculas de interés farmacológico asociadas a procesos isquémicos e inflamatorios como las retinopatías. Recientemente, demostramos que el tratamiento con ácido oleico nitrado (NO2-OA) induce la activación del factor de transcripción Nrf2 en la línea de CGM humana inmortalizada (MIO-M1), a través del aumento en la expresión de genes, tales como hemo-oxigenasa 1 (HO-1). Considerando estos hallazgos, planteamos la hipótesis de que los NO2-FA pueden modular la respuesta antioxidante y citoprotectiva en retinopatías neovasculares. Para ello, células MIO-M1 fueron preincubadas con NO2-OA y luego estimuladas con H2O2 (50-200 μmol/l) durante 1h. Los resultados mostraron que NO2-OA redujo el daño provocado por el H2O2. Posteriormente, con el propósito de analizar si el pretratamiento con NO2-OA era capaz de prevenir la reactividad glial, células MIO-M1 fueron preincubadas con NO2-OA por 30 minutos y luego estimuladas con α2M por 2, 4 y 6 hs. Los resultados demostraron que el pretratamiento con NO2-OA antes de las 6 hs de estimulo redujo los niveles de GFAP a niveles del control. En base a estos resultados, podemos concluir que el NO2-OA puede actuar como un antioxidante protegiendo a las células retinales del daño provocado por el H2O2 así como del estrés glial producido por α2M.