CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
FACTORES SOLUBLES DERIVADOS DE CÉLULAS DE CARCINOMA ANAPLÁSICO DE TIROIDES INDUCEN LA POLARIZACIÓN DE MACRÓFAGOS HACIA UN FENOTIPO PRO-TUMORAL
Autor/es:
GIUSIANO, LUCILA; STEMPIN, CINTHIA; PELLIZAS, CLAUDIA GABRIELA; FOZZATTI, LAURA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XII Congreso de la Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología (FASEN).; 2018
Institución organizadora:
Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología
Resumen:
El cáncer de tiroides representa la enfermedad maligna del sistema endócrino más común. Los tumores diferenciados tienen buen pronóstico; no obstante algunos pueden progresar hacia fenotipos tumorales más agresivos como el Carcinoma Anaplásico Tiroideo (ATC). Actualmente no existen terapias efectivas para el grupo de pacientes con ATC. Grandes progresos han sido realizados para identificar los determinantes moleculares y genéticos involucrados en carcinogénesis, llevando a la identificación y caracterización de oncogenes y supresores tumorales. Diferentes estudios han enfatizado el rol crítico del entrecruzamiento entre los diferentes tipos de células estromales y tumorales en los procesos involucrados en la progresión tumoral. Estudios previos de nuestro grupo demostraron la capacidad del fibroblasto (Fb) de regular el proceso de carcinogénesis tiroidea. Además de los Fb, los macrófagos constituyen los principales componentes celulares del microambiente tumoral (MT). La definición de la activación del macrófago evolucionó hacia el desarrollo de un modelo de clasificación en dos tipos de macrófagos activados: los macrófagos activados clásicamente (M1) y alternativamente (M2). Estas células del MT, llamados Macrófagos Asociados a Tumor o TAMs, presentan un fenotipo M2 o pro-tumoral. Evidencias clínicas y epidemiológicas han demostrado una fuerte asociación entre la densidad de TAMs con el mal pronóstico en varios tipos tumorales, incluyendo el cáncer tiroideo. Sin embargo, los mecanismos moleculares involucrados en los efectos pro-tumorales de los TAMs en el ATC siguen siendo en gran parte, desconocidos. Para entender el impacto funcional de factores solubles secretados por células derivadas de ATC humano sobre la regulación del fenotipo activado de monocitos, utilizamos un sistema in vitro de interacción célula tumoral-estroma, a través del co-cultivo de células THP-1 (monocitos humanos) con medios condicionados (MC) derivados de células de ATC: 8505c y KTC-2. En éstos, exploramos la modificación en la expresión de marcadores de polarización, de proliferación y la expresión de la citoquina inflamatoria IL-6.Establecimos y caracterizamos un modelo de polarización de macrófagos a partir de células THP-1, diferenciadas in vitro hacia un fenotipo M2 mediante IL-4. Obtuvimos un aumento en función del tiempo de la expresión de marcadores clásicos M2, tales como CD2016 o MRC-1, Dectina1 o CLEC7A y CCL13 en respuesta a IL-4 (citometría de flujo y RT-qPCR). En células THP-1, después del tratamiento por 24h con MC derivados de células de ATC, evidenciamos un incremento en la expresión del marcador M2, CCL13 (RT-qPCR), indicando la capacidad de los MC de modular la polarización o activación de los monocitos hacia un fenotipo M2 o pro-tumoral. En acuerdo con estos hallazgos, no encontramos diferencias significativas en los niveles de marcadores M1 clásicos analizados [Óxido Nítrico Sintasa inducible (Western blot) y nitritos (Griess)]. Por otro lado, analizamos los efectos de factores solubles liberados por células de ATC, sobre la proliferación de los monocitos (24h). Observamos un incremento en la expresión del marcador de proliferación Ki67 (citometría de flujo) y de la ciclina D1 (RT-qPCR) en células THP-1, como consecuencia del tratamiento con MC derivados de células de ATC. Además, un aumento marcado en los niveles de expresión de IL-6 en los monocitos fue evidenciado a las 24h de tratamiento con los MC (RT-qPCR). En conclusión, nuestros resultados aportan evidencias de la modulación del fenotipo activado de monocitos por efecto de factores parácrinos liberados por células de ATC, in vitro. Se espera que la profundización de este conocimiento proporcione nuevas evidencias sobre la etiología del ATC y a futuro, contribuya a delinear nuevas estrategias de diagnóstico y marcadores pronóstico permitiendo la optimización del tratamiento y un avance hacia la terapia personalizada de los pacientes con esta patología.