Chlamydia muridarum induce la activación de NFkB en cultivos primarios de células epiteliales prostáticas

MACKERN OBERTI JP; MOTRICH RD; GATTI G; ANDREANI V; MACCIONI M; RIVERO VE

Mendoza, Argentina

Jornada; XII Jornadas Argentinas de Microbiología I Jornadas Conjuntas de Microbiología, Infectología y Alergia e Inmunología de Cuyo III Jornadas Mendocinas de Zoonosis; 2006

Sociedad Argentina de Microbiologia

La prostatitis es una enfermedad urológica muy común, la cual es causada principalmente por infecciones ascendentes del tracto genitourinario. A pesar de que muchos trabajos han estudiado las infecciones por Chlamydia spp a nivel de mucosas, poco es lo que se ha avanzado en como la próstata puede responder a una infección local.  Estudios recientes han indicado que los receptores tipo TOLL son responsables del reconocimiento de LPS y otros componentes bacterianos manteniendo un rol fundamental  en la iniciación de la respuesta inmune innata y adquirida. Se ha postulado que tanto TLR2 como TLR4 pueden reconocer PAMPs (pathogen associated molecular patterns) de origen chlamydial.  Previamente hemos reportado que Chlamydia muridarum (Cm) induce cambios fenotípicos en células epiteliales prostáticas (CEP) de rata tales como aumento en la expresión de mRNA para citokinas, quemokinas y moléculas de superficie como así también aumenta la producción de oxido nítrico y la expresión de membrana de ICAM1. El objetivo de este trabajo es evaluar la expresión de TLR4 y moléculas que intervienen en el señalamiento junto con la activación del NFkB en CEP frente a la infección in vitro con Cm. Para cumplimentar este objetivo utilizamos la línea de CEP MAT-LU, obtenida de ATCC y cultivos primarios de CEP obtenidos en nuestro laboratorio siguiendo protocolos descriptos en la literatura. Estudios de RT-PCR revelaron que la infección por Cm de CEP fue capaz de incrementar los niveles de mRNA para TLR4 y CD14. Cuando evaluamos la expresión de estas moléculas mediante microscopía confocal (MC) observamos un incremento de expresión a nivel de la membrana de la inclusión chlamydial (IC). Mediante ensayos de colocalización pudimos detectar íntimo contacto entre TLR4 y CD14.  Cuando evaluamos la expresión MyD88, proteína involucradas en el señalamiento, observamos que su expresión también se encuentra estrechamente relacionada a la membrana de la IC suponiendo un activo rol en la activación celular. Al evaluar la activación celular de NFkB por MC, observamos que la estimulación de CEP con Cm es capaz de producir la translocación nuclear de NFkB. Como conclusión podemos afirmar que CEP incrementan la expresión de TLR4 y CD14 principalmente a nivel de la IC, los cuales podrían contactar con PAMPs chlamydiales. La  activación de la vía de NFkB nos indica que las CEP son capaces de reconocer a este patógeno y activar vías de señalamiento que tiene como objetivo inducir un estado inflamatorio. Con estos resultados planteamos que las CEP son capaces de reconocer PAMPs  y estarían participando activamente en los procesos inflamatorios locales.