CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
ROL DE LAS SUBUNIDADES FKSP DEL COMPLEJO 1,3-b-D GLUCANSINTASA DE CANDIDA GLABRATA SOBRE LA PRODUCCIÓN DE BIOFILM Y LA INTERACCIÓN CON CÉLULAS INMUNES
Autor/es:
ICELY PA, RODRÍGUEZ E, MIRÓ MS, VIGEZZI C Y SOTOMAYOR CE
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Congreso; XVI Congreso de la Sociedad Argentina de Infectologia SADI; 2017
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INFECTOLOGIA
Resumen:
Candida glabrata es el segundo agente causal de candidemias a nivel mundial, siendo sólo superada porC. albicans. Las equinocandinas son consideradas como la primera opción para el tratamiento de candidiasis invasorapor C. glabrata. Estas drogas actúan inhibiendo las subunidades Fksp (codificadas por los genes FSK1, FKS2 y FKS3)del complejo enzimático 1,3-β-D Glucansintasa responsable de la síntesis del componente principal de la pared celularfúngica, los 1,3-β-D glucanos. La resistencia clínica de C. glabrata a las equinocandinas ha sido relacionada conmutaciones en FKS1 y FKS2, pero la participación individual de cada uno de los genes FKS en la virulencia de estalevadura y su efecto sobre la activación y estimulación de células inmunes no ha sido estudiada.Objetivo: Evaluar el impacto de la deleción de los genes FKS1, FKS2 y FKS3 de C. glabrata en la producción defactores de virulencia como la capacidad formadora de biofilm y en la inducción de mediadores inmunes en macrófagosen cultivo.Materiales y Métodos: Se generaron mutantes de C. glabrata defectivos en los genes FKS1, FKS2 y FKS3, utilizando elgen URA3 como casete de selección por tres técnicas distintas: PRODIGE, PCR de fusión y con enzimas de restricción,respectivamente. La transformación de las levaduras se realizó por la técnica de Acetato de Litio utilizando como cepaparental C. glabrata LMDM331 (ATCC 90030 ΔURA3). La capacidad formadora de biofilm (CFB) de las cepas en estudiose evaluó por el método colorimétrico de XTT y de acuerdo al desarrollo, fueron clasificadas como Baja, Moderada y AltaCFB. Para los estudios In vitro se utilizó una línea celular de macrófagos(Ma) murinos(RAW); las células se incubaroncon cada cepa a dos relaciones patógeno:Ma (1:1 y 5:1) durante 24 hs. Posteriormente, la expresión de transcriptos decitoquinas proinflamatorias(IL-1beta, IL-6 y TNF-alfa) y antiinflamatorias(IL-10 y TGF-beta) se evaluó en las célulasinmunes mediante la técnica de PCR. C.albicans SC5314 se incluyó como cepa de control en todos los estudios.Resultados: La capacidad de las especies de Candida de adherirse tanto a superficies biológicas como inertesmediante la formación de biofilm es considerada un importante factor de virulencia. Mientras que C. albicans exhibióuna alta CFB, C. glabrata ΔURA3 fue clasificada como productora moderada (p