Oncogenes causantes de cáncer papilar tiroideo inducen la sobreexpresión de TLR4 asociada con características de agresividad

MARTIN, M; FERNANDEZ, EA; PELLIZAS, CG; PEYRET, V; GEYSELS, RC; MONTESINOS, MM; NICOLA, JP; NAZAR, M; QUINTAR, A; MALDONADO, CA; MASINI-REPISO, AM

Córdoba

Jornada; XIX JORNADA ANUAL CIENTÍFICA; 2017

Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba

Creciente evidencia sugiere que la señalización desregulada de receptores tipo toll (TLRs)promueve señales de supervivencia que favorecen la progresión tumoral. Recientemente,hemos demostrado sobreexpresión de TLR4 en el cáncer papilar de tiroides (PTC). Objetivo:estudiar el mecanismo molecular por el cual se sobreexpresa TLR4 en el PTC. Materiales ymétodos: La expresión de TLR4 fue estudiada en tejidos tiroideos derivados de FTCs yPTCs humanos y de PTCs de ratones transgénicos expresando BRAFV600E en tirocitos (Tg-BRAFV600E) (IHQ, RT/qPCR). Líneas celulares derivadas de células PCCL3 de rataexpresando condicionalmente los oncogenes más prevalentes del PTC (BRAFV600E,HRASG12V, RET/PTC3) en respuesta a doxiciclina y la línea celular BCPAP derivada de PTChumano fueron utilizadas en el estudio de la sobreexpresión de TLR4 (western blot,RT/qPCR, ARN de interferencia, ensayo de luciferasa). La base de datos del atlas delgenoma del PTC (TCGA) fue utilizada para diferentes análisis bioinformáticos combinados.Resultados: Previamente observamos mayor expresión de TLR4 en el PTC en comparacióncon tejidos tiroideos normales. En metástasis a nódulos linfáticos de PTC comprobamos unsignificativo incremento en los niveles de TLR4 respecto a muestras apareadas del tumorprimario. En concordancia se observó un incremento en los niveles de TLR4 en célulastiroideas normales que expresan BRAFV600E y en tejidos tiroideos de ratones transgénicosTg--BRAFV600E. Además, hemos demostrado expresión funcional de TLR4 en modeloscelulares de PTC humano a través de una incrementada actividad transcripcional de NF-κBen respuesta al agonista exógeno de TLR4, lipopolisacárido (LPS). A través del análisisbioinformático de datos del atlas del genoma del PTC (TCGA) revelamos que pacientes contumores BRAFV600E positivos con incrementada expresión de TLR4 presentaron menorsupervivencia libre de enfermedad. El análisis del transcriptoma indicó una correlaciónpositiva entre los niveles de expresión de TLR4 y la activación de la señalización MAPK/ERK.Consistentemente, el bloqueo químico de la señalización de MAPK/ERK previno la expresiónde TLR4 inducida por BRAFV600E. Análisis de deleciones del promotor de TLR4 reveló un sitiocrítico de unión a Ets sensible a MAPK/ERK involucrado en la respuesta a BRAFV600E.Coincidentemente, evidenciamos que el factor de transcripción ETS1 es esencial para inducir la expresión de TLR4 dependiente de la señalización de MAPK/ERK inducida por BRAFV600E.Discusión: En conjunto, nuestros datos indican que la sobreexpresión funcional de TLR4 en PTCs es una consecuencia de la desregulación de la señalización MAPK/ERK/ETS1 inducida por oncogenes causantes de tumores tiroideos. Considerando el potencial oncogénico de la activación aberrante de la señalización de NF-κB en la promoción del crecimiento tumoral tiroideo y la asociación de incrementados niveles de TLR4 con tumores más agresivos, nuestros resultados sugieren un rol pro-oncogénico de TLR4 en la tumorigénesis tiroidea, dando la base molecular para el desarrollo de nuevos abordajes terapéuticos.