Participación de ERO en la toxicidad inducida, in vitro, por AFB1, FB1 y mezclas de ambas toxinas en ratas.

MARY, VS; THEUMER, MG; RUBINSTEIN, HR

Córdoba

Congreso; III Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos Córdoba; 2009

Gobierno de la provincia de Córdoba

Las micotoxinas  son contaminantes de alimentos, que producen efectos tóxicos en humanos y animales de producción, como cáncer hepático y esofágico, en los casos de aflatoxina B1 (AFB1) y fumonisina B1 (FB1). En la toxicidad inducida por éstas toxinas podría estar involucrada la generación de especies reactivas de oxígeno (ERO). Objetivos Profundizar el conocimiento acerca la generación de ERO inducido por AFB1 y FB1 y evaluar el comportamiento  in Vitro, de la mezcla de ambas micotoxinas en relación a las toxinas individuales, en células mononucleares de bazo (CMB)  de ratas Wistar. Resultados La cuantificación de ERO se hizo por citometría de flujo, mediante DCFH-DA. Se incubó CMB  con o sin AFB1 (20µM), FB1 (10µM) y MIX (AFB1 20µM + FB1 10µM) por 24hs y se observó aumento en la intensidad de fluorescencia media de 36, 35 y 45% respectivamente con respecto al control, (p<0.001 en todos los casos). La MIX no produjo diferencias significativas con respecto a AFB1 y FB1. Se analizó el porcentaje de células con fluorescencia positiva,  observándose aumento con respecto al control de 42 (p<0.01), 44 (p<0.01) y 91% (p<0.001) para AFB1, FB1 y MIX respectivamente. La MIX produjo diferencias significativas (p<0.001)  con respecto a las toxinas individuales. En los dos análisis, no hay diferencias significativas entre AFB1 y FB1. Discusión y Conclusión La intensidad de fluorescencia media  indica la generación de ERO promedio por célula, dependiendo del grado de oxidación de la zonda DCFH-DA intracelularmente, el cual aumenta al aumentar el estrés oxidativo. El porcentaje de células con fluorescencia positiva se refiere a células que generan ERO, el aumento significa que más células producen ERO. En nuestros resultados AFB1 indujo aumento en la generación de ERO respecto al control lo que podría  deberse a la bioactivación de AFB1 por citocromo p450. La producción de ERO mediada por FB1 ha sido poco estudiada. Nosotros observamos que FB1 indujo aumento de ERO, con respecto al control. La generación de ERO podría estar relacionada a la acción inhibitoria de FB1 sobre ceramida sintetasa, que ocasiona disrupción del metabolismo lipídico y acumulación de bases esfingoides. Existen pocos datos sobre la coexposición a AFB1 y FB1. En este trabajo observamos que la MIX indujo aumento en la producción de ERO en similar proporción a las toxinas individuales. Esto podría deberse porque la inducción de ERO por FB1 estaría disminuida por el H2O2 generado en la MIX que estimula  la actividad de ceramida sintetasa. La MIX induce similar grado de estrés oxidativo que AFB1 y FB1 pero afecta el doble de la población que las toxinas individuales. Las micotoxinas estudiadas en forma individual y conjunta inducen estrés oxidativo en células del sistema inmune, lo que podría afectar la inmunidad antitumoral  y favorecer las patologías producidas por éstas toxinas.