Productos de excreción-secreción de Fasciola hepatica regulan la activación de macrófagos peritoneales

GUASCONI L; SERRADELL MC; MASIH DT

La Falda

Otro; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Fasciola hepatica es un helminto que afecta un amplio rango de mamíferos, incluyendo al hombre. Durante su complejo ciclo de vida este parásito libera productos de excreción-secreción (PES) compuestos por componentes glicoprotéicos sobre los cuales han sido descriptos numerosos mecanismos de inmunomodulación. Por otra parte, Macrófagos (Mf) peritoneales constituyen una de las primeras células de la inmunidad innata con las que el parásito contactará al ingresar al hospedador, por ello decidimos estudiar la interacción de PES con estas células. Habiendo observado que PES de F. hepatica son capaces de inhibir la producción de NO y aumentar la actividad Arginasa y producción de IL-10 inducidos por LPS, se decidió evaluar la participación de receptores involucrados en estos fenómenos. Para ello Mf peritoneales obtenidos de ratones Balb/c normales fueron previamente incubados con Laminarina (bloqueante para el receptor Dectin-1) durante 30 minutos a 37Cº, luego del lavado se estimularon las células por 24 hs con PES(20mg/ml) o medio solo. Posteriormente, previo lavado, se estimuló las células con LPS y se cultivó por 48 más a 37ºC y 5%CO2. Luego del cultivo, se determinó producción de NO (reacción de Griess), producción de IL-10 (ELISA),  y actividad de Arginasa (midiendo la concentración de urea luego de la hidrólisis de L-arginina). Observamos que Laminarina revierte parcialmente el efecto de disminución de NO inducido por  LPS en  Mf peritoneales estimulados previamente con PES (p<0,015), así como también el aumento inducido en la actividad Arginasa  e IL-10 (p<0,033 y 0,00087 respectivamente). Dectin-1  subsecuentemente señaliza via Syk (Spleen  tyrosine kinase); utilizamos un inhibidor de Syk y  observamos que este revierte parcialmente el efecto inducido por PES frente a LPS sobre la actividad Arginasa (p<0,035). Los resultados nos permiten concluir la participación de Dectin-1 en el reconocimiento de PES de F. hepatica por Mf peritoneales. Se podría suponer un posible cross-talk entre TLR-4 y Dectin-1 en este fenómeno, hecho que nos estimula para seguir profundizando en las vias de señalización utilizadas por PES para modular la conducta de estas células de la inmunidad innata.