Expresión de Aromatasa b en Jenynsia multidentata y su aplicación como biomarcador de la presencia de disruptores endócrinos en recursos hídricos

GUYÓN, NOELIA; GALANTI, LUCAS NICOLÁS; BISTONI, MARÍA DE LOS ANGELES; WUNDERLIN, DANIEL ALBERTO; AMÉ, MARÍA VALERIA

Mar del Plata

Congreso; II Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC); 2008

SETAC

La cyp19a2 es una enzima esteroidogénica miembro de la superfamilia de citocromo P450 que cataliza la conversión de andrógenos C-19 (como testosterona y androstenediona) en estrógenos C-18 como el estradiol. Se ha observado que distintos tóxicos ambientales afectan su expresión y/o actividad. El objetivo de este trabajo fue evaluar cambios en la expresión de Aromatasa B en cerebro de hembras de Jenynsia multidentata recolectadas en sitios con diferente grado de contaminación del Río Suquía (Córdoba, Argentina). Para ello, se diseñaron primers degenerados a partir de las secuencias nucleotídicas conocidas de regiones altamente conservadas de aromatasa cerebral (Cyp19b) de otras especies de peces. Una vez identificado el producto de PCR con el peso molecular esperado, se clonó en el vector pCR 2.1, se analizó su secuencia y se registró en GenBank (Nº EU851873). Comparando la secuencia de Jenynsia multidentata con una base de datos (Blast-nucleótidos) se obtuvieron entre un 74 y un 90% de homología con Cyp19b identificadas en otras especies; observándose la mayor identidad con aromatasa de Poecilia reticulata. A partir de la secuencia obtenida se diseñaron nuevos primers para evaluar la expresión de esta enzima por Real Time RT-PCR utilizando como control interno B-actina. Se midió la expresión de Cyp19b en cerebros de hembras colectadas durante el mes de julio de 2006 en 4 sitios de muestreo a lo largo del Río Suquía, en donde se observa un deterioro marcado en la calidad del agua después de que el río atraviesa la ciudad de Córdoba.   Los resultados muestran una disminución de la expresión de Cyp19b en los sitios que, de acuerdo a estudios previos, presentan mayores niveles de contaminación (Capilla de los Remedios y Corazón de María), con respecto a los sitios que se encuentran en mejores condiciones (La Calera y Río Primero). Estos resultados estarían indicando la presencia de disruptores endócrinos en los tramos del río más contaminados. De acuerdo a esto, los cambios en la expresión de la aromatasa cerebral en Jenynsia multidentata podrían ser utilizados como biomarcador de la exposición a contaminantes ambientales causantes de disrupción endócrina.