El receptor de Hormonas Tiroideas Beta 1 es Esencial en el Efecto Mediado por T3 en Células Dendríticas: Un Nuevo Gen Target de NF-kB

MASCANFRONI IVAN DARÍO, MONTESINOS MARÍA DEL MAR, RABINOVICH GABRIEL A Y PELLIZAS CLAUDIA G.

La Falda, Córdoba

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología y XI Reunión del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo. SAI 2008.; 2008

Las células dendríticas (DC), CPA profesionales, son las únicas con la capacidad de activar linfocitos T vírgenes y orquestar la inmunidad adaptativa. Previamente demostramos que DC expresan el receptor de HT beta 1 (TRb1) y que niveles fisiológicos de triiodotironina (T3) estimulan la expresión de marcadores de maduración de DC y su capacidad para inducir proliferación de células T vírgenes promoviendo el desarrollo de una respuesta Th1, siendo mediado este efecto por NF-kB. El objetivo del presente estudio fue investigar las vías de señalización implicadas en el efecto mediado por T3 en DC y evaluar TRb1 como un posible gen target de NF-kB. DC se obtuvieron de células de médula ósea de ratón cultivadas en presencia de GM-CSF, un grupo fue transfectado con siRNA para TRb1 y posteriormente expuestas a la acción de T3 durante 30 min y 18 h en presencia de inhibidores de NF-kB y de Akt. Marcadores de maduración, IL-12 intracelular y fosforilación de proteínas fueron evaluados. La activación de NF-kB fue estimada indirectamente por la degradación de IkB-alfa. La expresión de TRb1 fue determinada por WB y la unión de NF-kB a su promotor examinada por inmunoprecipitación de la cromatina. Los resultados indicaron que el incremento tanto en la expresión de marcadores de maduración (p< 0.01) como en la frecuencia de células CD11c+ productoras de IL-12 (P < 0.01) inducidos por T3 fue totalmente revertido por el tratamiento con siRNA para TRb1 (p<0.01) y los inhibidores de Akt y NF-kB (p<0.01 y 0,05 respectivamente). En el mismo sentido, T3 incremento la fosforilación de Akt y la degradación de IkB-alfa con un máximo a los 30 min, mientras que la fosforilación de MAP kinasas no fue modificada. La incrementada activación de NF-kB inducida por T3 derivó además en una mayor interacción con el promotor de TRb1 (p<0.01), regulando la expresión de la proteína la cual fue máxima a los 30 min y revertida por el tratamiento con los inhibidores de NF-kB utilizados. Estos resultados indican fuertemente que el efecto inducido por T3 en DC es mediado por activación de la vía Akt-NF-kB en el que el receptor TRb1 resulta esencial. A su vez en este trabajo ponemos en evidencia a TRb1 como nuevo gen target de NF-kB. Estos resultados abren nuevas perspectivas para la manipulación de DC lo cual podría tener profundas implicaciones en inmunoterapéuticas, incluyendo cáncer y manifestaciones de las glándulas tiroideas a nivel de las interacciones inmunes y endocrinas.