Caracterización de microvesículas y exosomas como vehículos del mensaje invasivo en el microambiente tumoral tiroideo

DELLA VEDOVA AB; MASINI-REPISO, ANA M.; BRAVO MIANA, ROCÍO; DONADIO, ANA C.; REMEDI, MARÍA M.; PELLIZAS, CLAUDIA G.

Termas de Río Hondo

Congreso; XI Congreso de la Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología (FASEN); 2016

FASEN

El microambiente tumoral está formado por células estromales como fibroblastos(Fb), células endoteliales, células inmunes, embebidas en una matriz proteicaextracelular (MEC), en estrecha y activa interacción con la célula neoplásica. Lascélulas malignas promueven su propio desarrollo, progresión y metástasis a través dela modulación de su microambiente. Tradicionalmente las metaloproteinasas (MMPs),producidas por la célula tumoral y otras células del huésped, han sido asociadas a lainvasión y modulación del microambiente tumoral. Sin embargo, cada vez másevidencias posicionan a vesículas extracelulares, como microvesículas (MVs) y/oexosomas (Exo) producidas por células del tumor, como moduladores delmicroambiente tumoral (1). CD147 es una proteína de membrana, con un amplio rangode funciones en salud y enfermedad humana, activamente involucrada en la secrecióny activación de MMPs. CD147 se describió en MVs aisladas de líneas celularestumorales de ovario, pulmón, en líneas celulares y células de pacientes con MielomaMúltiple y cáncer de mama, y participando en la interacción célula tumoral-estroma ycomunicación intercelular.El Cáncer de Tiroides (CT) es la enfermedad maligna del sistema endócrino conmayor prevalencia. Aunque la tasa de mortalidad por cáncer tiroideo es relativamentebaja, la tasa de recurrencia o persistencia de la enfermedad es alta, asociándose amayor morbilidad y mortalidad en los pacientes. La contribución del microambientetumoral en la progresion del CT no ha sido profundamente explorada, sin embargo,utilizando un modelo experimental de Carcinoma Papilar Tiroideo progresivo seevidenció el reclutamiento de Fb, la deposición de colágeno I y la remodelaciòn de laMEC como elementos claves en la progresión tumoral (2). El objetivo de nuestrotrabajo es caracterizar eventos bioquímicos y moleculares comprometidos en laprogresión de neoplasias tiroideas y su modulación por componentes normalesdel estroma.Utilizando un modelo in vitro de interacción célula tiroidea-estroma, por medio del cocultivode células tumorales (TPC-1, carcinoma papilar; 8505c carcinoma anaplásico),no tumorales (N-ThyOri) y Fb normales como célula representativa del estroma, seestudió el impacto de esta interacción en la expresión de CD147 (por citometría deflujo e imunofluorescencia) en las células co-cultivadas y en medios condicionados(MCs), MVs y/o Exo, obtenidos de los co-cultivos, a través de ensayos de western blot.Resultados previos muestran que la interacción Fb-célula tumoral tiroidea promuevela secreción de proMMP9, proMMP2 y la activación de MMP2 a MCs. A su vez,factores solubles presentes en MCs del co-cultivo célula tumoral-Fb aumentan elporcentaje de células tumorales tiroideas con fenotipo migratorio, manifestado por lapresencia de filopodios y/o lamelipodios, evento no observado en células tiroideas notumorales. La interacción célula tiroidea-Fb aumentó la expresión de CD147 en Fb,independientemente de la célula tiroidea utilizada en los co-cultivos; no modificó laexpresión total de este antígeno en las células tiroideas, cambiando en cambio sudistribución en membrana celular en células TPC-1 y 8505c co-cultivadas. El análisisde MCs obtenidos de los co-cultivos evidenció la presencia de MVs y EXo, con unaumento de la expresión de CD147 en MVs y Exo obtenidas del co-cultivo TPC-1-Fb y8505c-Fb, sin cambios significativos al utilizar células N-ThyOri en los co-cultivos. Nopudo evidenciarse CD147 en forma soluble en los MCs. Los resultados obtenidossugieren que CD147 podría tener un rol activo en eventos de comunicación intercelularen el microambiente tumoral tiroideo, estimulando la liberación de MMPs por célulasde este entorno y la consecuente migración e invasión celular.1- Tkach M & Théry C. Cell, 2016. 164: 1226-32.2- Jolly LA y col. Cancer Res, 2016. 76: 1804-13.