Productos excretores-secretores (PES) de Fasciola hepatica inducen apoptosis de eosinófilos (Eo) in vivo. Participación del peróxido de hidrógeno

SERRADELL MC; GUASCONI L; MASIH DT.

Rosario. Argentina

Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2008

SAPyEP

En nuestro modelo de fasciolosis en ratas hemos demostrado la presencia de Eo apoptóticos en hígado (21 días p.i) y en peritoneo (48 h p.i). En ensayos in vitro se observó que PES de F. hepatica inducen apoptosis de Eo dependiente de la producción de derivados tóxicos de oxígeno, principalmente H2O2. En el presente estudio, se evaluó el efecto de la administración de los PES sobre la viabilidad y producción de H2O2 en Eo peritoneales. Se trabajó con 4 grupos de ratas Wistar machos de 10-12 semanas. Dos grupos de animales se inyectaron vía i.p con 1.6 mg de PES, uno de ellos se inyectó además con catalasa. Los grupos controles fueron tratados solo con catalasa o solo con PBS. A las 18 h se obtuvieron los Eo de peritoneo por purificación con gradiente de Percoll. La apoptosis se determinó por tinción con Anexina y los niveles intracelulares de H2O2 con el colorante redox-sensible CM-H2DCFDA. En ambos casos el análisis se realizó por citometría. En los animales inyectados con PES se observó un incremento de Eo apoptóticos y de la producción de H2O2 intracelular respecto a los animales con PBS (p<0,05). En el grupo inyectado con PES-catalasa, los índices de apoptosis y de H2O2 estuvieron significativamente disminuídos respecto al grupo solo con PES (p<0,05). No se observaron diferencias significativas entre los animales inoculados solo con catalasa o PBS. Estos hallazgos proveen evidencia que los PES no solo promueven apoptosis de Eo vía la producción de H2O2 in vitro, sino que también lo realizan in vivo. Así, la inducción de estrés oxidativo por el parásito participaría en la muerte de Eo durante etapas tempranas de la infección, teniendo los PES una participación clave en esta estrategia de inmunoevasión.