Expresión y localización de Galectina 1 durante el desarrollo de Retinopatía Inducida por Oxígeno (OIR)

RIDANO, ME; PAZ, MC; LORENC, VE; CROCI, DO; BARCELONA, P; SANCHEZ, MC; SUBIRADA CALARDONE, PV; LUNA, JD; RABINOVICH, GA

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología; 2016

Asociacion de Investigacion en Vision y Oftalmologia

Objetivos: Galectina1 (Gal1) es una lectina que actúa en diversos procesos fisiopatológicos. Gal1 promueve la progresión tumoral a través de mecanismos que incluyen la evasión de la respuesta inmune y la estimulación angiogénica. Además, su expresión está regulada por hipoxia y su unión a glicanos en VEGFR2 ha sido asociada a la regulación de la neovascularización (NV) en tumores refractarios a tratamientos con Anti-VEGF (Croci y col 2014). Considerando que las retinopatías neovasculares (RxNV) son las principales causas de ceguera irreversible y que muchos pacientes no responden adecuadamente al tratamiento con Anti-VEGF, se propuso evaluar si Gal1 participa en la fisiopatología de RxNV. Métodos: Retinopatía inducida por oxígeno (OIR): ratones C57BL/6 fueron expuestos a 75%O2 desde el día postnatal 7 (P7) al P12 y llevados a aire durante 5 (P17 OIR) o 9 días (P26 OIR). Como control se utilizaron animales de igual edad mantenidos en aire (RA). Algunos ratones P12 OIR se sometieron a inyecciones intravítreas con Anti-VEGF o PBS. La expresión retinal de VEGF y Gal1 se analizó por Western blot y qRTPCR y la localización de Gal1 mediante Inmunofluorescencia utilizando anticuerpos contra marcadores celulares específicos como GFAP y CD31. Además el perfil de glicosilación de las retinas se analizó mediante comarcaciones con las lectinas biotiniladas LEL, L-PHA y SNA.Resultados: Los niveles proteicos y de ARNm de Gal1 se encontraron aumentados en P17 y P26 OIR respecto a RA incluso en las retinas de ratones inyectados con Anti-VEGF. Tanto en RA como en OIR Gal1 se localizó en las capas retinales más cercanas al vítreo (NFL, GCL and IPL). Gal1 colocalizó con GFAP en P17 y P26 RA y OIR y se observó en el interior de células CD31 positivas solo en NV durante OIR. Además se hubo una alta colocalización de Gal1 con LEL en P17 tanto en RA como OIR y sólo en OIR con L-PHA. La marcación de SNA disminuyó en retinas OIR y no se observó colocalización con Gal1.Conclusiones: Los resultados sugieren que Gal1 participa en la NV retinal durante OIR. El perfil de glicosilación en OIR fue favorable para la unión de Gal1, lo cual podría indicar su acción mediante unión a glicanos de VEGFR2. Además, la acción de Gal1 sería independiente del tratamiento con Anti-VEGF.Subsidios y Agradecimientos: Se agradece a los subsidios de FONCYT, CONICET y SECyT y a la colaboración de los Dres. Gustavo Chiabrando y Gustavo Bonacci y a sus grupos de trabajo.