Respuesta diferencial de las subpoblaciones de linfocitos B peritoneales a la estimulación con CpG-ODN y BAFF

AMEZCUA-VESELY MC; ACOSTA RODRIGUEZ EV; MERINO MC; BERMEJO DA; MONTES CL; GRUPPI A

La Falda, Córdoba

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Los linfocitos (Li) B1 y B2 peritoneales se diferencian por su fenotipo y capacidad de responder a distintos estímulos. A su vez, la respuesta de estas poblaciones podría ser modulada de manera diferencial por citoquinas del medio que, como BAFF, regulan la maduración, activación y sobrevida de los LiB. Nuestro objetivo fue evaluar la respuesta de LiB1 y B2 frente CpG-ODN (ligando de TLR-9) y su modulación por BAFF. Para ello, LiB1 y B2 purificados por cell sorting a partir de células peritoneales de ratones C57BL/6, fueron estimulados con 2ug/ml de CpG con o sin 150 ng/ml de BAFF. Luego de 48h de cultivo,  se determinó por ELISA que LiB1, pero no LiB2, produjeron altas cantidades de IL-10 en respuesta a CpG y estas cantidades no variaron en presencia de BAFF. El agregado de BAFF tampoco modificó los niveles de IL-6 y TNF producidos por LiB1 y B2 respuesta a CpG. A pesar de no afectar el porcentaje de células plasmáticas (CD138+), BAFF incrementó significativamente (p=0,02) la producción de IgA por LiB1 estimulados con CpG como se determinó por ELISA (CpG 35±6; CpG+BAFF 78±25). La secreción de IgA por LiB2 fue residual y no se modificó en presencia de BAFF. Por otro lado, los LiB1 secretaron 1043±22 ng/ml de IgM en respuesta a CpG mientras que los LiB2 liberaron menos de 100 ng/ml en estas condiciones. Además, los LiB2 estimulados con CpG no produjeron cantidades detectables de los isotipos de IgG mientras que los LiB1 secretaron IgG2a (12±5 ng/ml), IgG2b (58±4 ng/ml) y pequeñas cantidades de IgG3. El aporte de BAFF no modificó la capacidad de LiB1 ni B2 para producir IgM o isotipos de IgG. Dada su función biológica, analizamos si BAFF es capaz de modular la expresión de FcgammaReceptorIIB (FcR), receptor involucrado en la apoptosis de LiB activados. LiB1 mostraron por citometría de flujo una mayor expresión de FcR que los LiB2 (MFI 6,1 vs 2,9), y esta expresión se incrementó en ambas subpoblaciones en respuesta a CpG. El agregado de BAFF redujo notablemente este incremento de expresión especialmente en los LiB1 (MFI CpG 9,9; CpG+BAFF 3,6), posiblemente debido a su mayor expresión de BAFF-R y TACI (receptores de BAFF). Nuestros resultados sugieren que BAFF favorece el cambio de isotipo a IgA en los LiB1 estimulados con ligandos de TLR-9. Además, al reducir la expresión de FcR, BAFF podría afectar la susceptibilidad de los LiB a la apoptosis mediada por el entrecruzamiento de FcR, contribuyendo a la ruptura de tolerancia y al desarrollo de autoinmunidad.