Evaluación preclínica de la Eficacia y Seguridad del tratamiento combinado Benznidazol-Clomipramina en la enfermedad de Chagas experimental

GARCÍA, MC; SANMARCO, LM; PONCE, NE; MANZO, R; JIMENEZ KAIRUZ, A; AOKI, MP

Congreso; VI Congreso Iberoamericano de Ciencias Farmacéuticas; 2015

La enfermedad de Chagas (EC) causadapor el parásito Trypanosoma cruzi, esendémica en Latinoamérica. El escasointerés de la industria farmacéutica, llevó a la OMS a catalogarla como una enfermedaddesatendida. Para su tratamiento el fármaco de elección es benznidazol (BZ),con una eficacia ≥80% en fase aguda, pero presenta propiedades fisicoquímicasdesfavorables y una alta incidencia de efectos adversos. La enzima tripanotionareductasa resultó de interés en la búsqueda de nuevos blancos terapéuticosespecíficos y clomipramina (CMP) es un inhibidor efectivo. Con el objetivo de caracterizarla actividad tripanocida de BZ asociado a CMP y obtener dosis óptimas, realizamosestudios in vitro e in vivo para la evaluación preclínica dela eficacia y seguridad del tratamiento en un modelo murino.Para los estudios in vitro se adaptó la metodología checkerboard test, a los fines de minimizarel uso de animales en la búsqueda inicial de combinaciones óptimas. Seincubaron 106 trypomastigotes/mL (cepa Tulahuen), en sangreperiférica murina y medio DMEM. Los fármacos (F) se evaluaron enconcentraciones de 0 a 64 µg/mL y los resultados permitieron determinar que elíndice de combinación es de 0,375; indicativo de que CMP actúa como sinergistade BZ. Sobrela base de los estudios in vitro, realizamosensayos preclínicos para evaluar la eficacia y seguridad del tratamiento,estableciendo las dosis de los F mediante aproximación alométrica y considerandosus parámetros farmacocinéticos. Se emplearon ratones BALB/c infectados por víaip con 103 trypomastigotes, los que a partir del 1° día post-infección(dpi) fueron tratados diariamente durante 14 días por vía per-oral con diferentesdosis de BZ (entre 12,5-100 mg/kg) sólo o asociado a CMP en dosis fija (7,5mg/kg). A los 15 y 90 dpi se determinó la parasitemia o la carga parasitaria porqPCR, respectivamente, y se analizó el peso de órganos relevantes, nivelesséricos de marcadores de daño tisular, cambios electrográficos e histopatológicoscardíacos. A15 dpi BZ en dosis de 100 y 50 mg/kg presentó una marcada eficacia, pero endosis de 25 mg/kg si bien solo no logró anular la parasitemia, cuando se locombinó con CMP su acción sinergista permitió un efecto tripanocida eficaz(p<0,001). A 90 dpi los animales tratados con 100 mg/kg de BZ no exhibieroncarga parasitaria. Los tratados con BZ-CMP presentaron una leve cargaparasitaria, pero significativamente menor que los animales no tratados(p<0,05). Respecto de la seguridad, durante la fase crónica (90 dpi) CMP asociadaa bajas dosis de BZ disminuyó el daño cardíaco y mejoró las características dela cardiomiopatía crónica, evaluado por el índice de inflamación miocárdica(p<0,05), alteraciones electrocardiográficas y marcadores séricos. La actividadsinergista de la combinación de los F evidencia una potencial utilidad para eltratamiento de la EC, que permitiría el empleo de menores dosis de BZ con una importante  eficacia y mayor seguridad terapéutica.