EFECTO DEL LASER SOBRE LA PROLIFERACION DE CELULAS MADRE MESENQUIMALES DE PULPA DENTAL

MARTÍN G; PREVE V; SAINT-JEAN N; INOSTROSA C; SOTOMAYOR CE; BRISUELA C

Salta

Encuentro; X Encuentro de investigación en Endodoncia; 2015

Sociedad Argentina de Endodoncia

El tratamiento de Regeneración pulpar es un procedimiento biológico basado en la Ingeniería Tisular donde células madre, factores de crecimiento y matriz biológica constituyen los tres componentes principales para la formación de un nuevo tejido. El láser de baja potencia, Diodo Ga Al As de 660 nm es usado con fines terapéuticos para estimular la actividad celular. El objetivo del presente estudio fue evaluar in vitro el efecto del láser de baja potencia sobre la viabilidad y proliferación de células madre mesenquimales de pulpa dental (DPSCs) en cultivo. Método: Las células fueron obtenidas de tejido pulpar sano de un tercer molar extraído por razones quirúrgicas. El explante pulpar fue cultivado y expandido hasta observar confluencia celular. Las células aisladas se inmunocaracterizaron empleando anticuerpos monoclonales específicos por citometría de flujo y se diferenciaron a tres linajes para cumplir con los criterios de la International Society for Cellular Therapy (ISCT).Se incubaron en placas en una concentración de 20.000 células/pocillo en un volumen de medio de cultivo Alfa-MEM conteniendo 10% de suero fetal bovino y 1% de antibiótico PenStrep. Se trabajó con 2 grupos de 10 pocillos cada uno: Grupo TRATADO: Se aplicó Láser Therapy XP, con emisión continua a una potencia de 100 mW, 1 ciclo de 30 segundos por pocillo. La dosis en cada emisión fue de 3 J/cm2, cada 24 horas(h) durante 7 días. Grupo CONTROL: sin láser. Los cultivos fueron incubados a 37°C y una atmósfera CO2 5% durante 7 días; los cuales fueron observados diariamente en microscopio de fase invertida para evaluar su confluencia. La viabilidad celular fue determinada empleando el colorante fluorescente Calcein AM BD Pharmingen? y la proliferación celular fue cuantificada mediante la reducción de sales de tetrazolio y lectura colorimétrica (DO). Resultados: Las células tratadas con láser alcanzaron el 80% de confluencia a las 96 h de cultivo, mientras que en el grupo CONTROL, el 80% de confluencia fue observado luego de 144 h. Las células fueron positivas para Calcein AM y los valores de DO para ambos grupos no mostraron diferencias significativas a los 7 días. Conclusión: La aplicación del láser de baja potencia sobre DPSCs aceleró la proliferación celular, sin modificar su viabilidad. La proliferación temprana es crucial para la diferenciación celular en el tratamiento de Regeneración pulpar.