Retinopatia Diabetica:un nuevo modelo animal murino

PAZ MC; SUBIRADA CALDARONE PAULA; RIDANO MAGALI E; CASTRO C; SANCHEZ MC

Congreso; XL Reunion anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

La diabetes tipo 2 asociada con obesidad, dislipemia y otros factores de riesgo cardiovascular, constituye el síndrome metabólico (SM). Una de las complicaciones microvasculares mas graves es la retinopatía diabética (RD). Varios modelos animales han sido estudiados para RD pero ninguno ha sido capaz de reproducir las etapas más avanzadas de la enfermedad. En este trabajo se propone caracterizar un modelo animal de RD que conjugue las alteraciones metabólicas involucradas en el SM y reproduzca la etapas observadas en humanos. Para este objetivo 4 grupos de ratones fueron utilizados: 1) ratones C57BL/6 alimentados con dieta normal (DN) (control), 2) ratones C57BL/6 alimentados con dieta rica en fructosa (WT DF), ratones deficientes en apolipoproteína E (ApoE-KO) alimentados con DN (ApoE-KO DN) y ApoE-KO alimentados con DF (ApoE-KO DF). La DF (10%) fue suministrada en el agua de bebida a partir de los 2 meses (M) de edad. A los 8 M de edad se realizaron estudios funcionales retinales (ERG) y posteriormente los animales se sacrificaron y sobre las retinas extraídas se realizaron estudios estructurales y bioquímicos. El ERG mostró alteraciones significativas en los animales WT DF y en ambos grupos de ratones ApoE-KO (DN y DF). Los potenciales oscilatorios estuvieron disminuidos en los WT DF y ausentes en los ApoE-KO (DN y DF), siendo revertidos en animales que recibieron pioglitazona (20 mg/kg) como hipoglucemiante. El estudio de la retina completa (flatmount), mostró una disminución en la densidad de la arborización vascular en los ApoE-KO (DN y DF), y una disminución de células musculares lisas (α-SMA) tanto en los ApoE-KO como en los WT DF. Al evaluar la muerte celular, se observaron células TUNEL-positivas principalmente a nivel de la capa de células ganglionares en los WT DF siendo mayor el numero en los ApoE-KO (DN y DF). Por ensayos de inmunofluorescencia se observó expresión de la proteína acida fibrilar de la glía (GFAP) en astrocitos de WT DN, mientras que los WT DF mostraron además expresión en células gliales de Müller activadas, siendo incrementada en los ApoE-KO (DN y DF). Los resultados indican que la deficiencia de ApoE es suficiente para inducir alteraciones retinianas y que la hiperglucemia sería en parte la responsable. Posteriores estudios permitirán caracterizar los mecanismos involucradas en el desarrollo de la RD en este modelo animal de SM.