Fasciola hepatica induce apoptosis de eosinófilos dependiente de peróxido de hidrógeno durante la infección en ratas

SERRADELL MC; GUASCONI L; MASIH DT

La Falda

Otro; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Hemos demostrado la presencia de eosinófilos (Eo) apoptóticos en hígados de ratas 21 días posteriores a la infección vía oral con metacercarias de Fasciola hepatica. En ensayos in vitro se observó que productos excretores-secretores (PES) liberados por F. hepatica fueron capaces de inducir apoptosis de Eo de manera dependiente de la producción de derivados tóxicos de oxígeno (DTO), principalmente peróxido de hidrógeno (H2O2). El control sobre la respuesta inmune temprana es importante como un mecanismo de inmunoevasión ya que le permite al parásito establecerse y sobrevivir en los tejidos del hospedador. En este trabajo se investigó la apoptosis de Eo durante estadíos tempranos de la infección evaluando una posible participación de H2O2. Para ello se trabajó con 4 grupos de ratas Wistar machos de 10-12 semanas de edad. Dos grupos se infectaron oralmente con 30 metacercarias, uno de ellos se inyectó además con catalasa (descompone H2O2 en H2O y O2) por vía intraperitoneal 24 hs posteriores a la infección (p.i.). Los grupos controles consistieron en animales sin tratamiento y animales solo inyectados con catalasa. A las 48 hs p.i. se obtuvieron los Eo de peritoneo y se purificaron con gradiente de Percoll. La apoptosis se determinó por tinción con Anexina V-FITC/Ioduro de propidio y los niveles intracelulares de H2O2 con el colorante redox-sensible CM-H2DCFDA (diclorofluoresceína). En ambos casos las células se analizaron por citometría de flujo. En los animales infectados se observó un significativo incremento de Eo apoptóticos y de los niveles de H2O2 intracelular (p<0.05) respecto a los grupos controles. En los animales infectados que recibieron catalasa ambos parámetros se encontraron significativamente disminuidos (p<0.05) respecto al grupos solo infectados. En este trabajo se logró vincular el fenómeno de estrés oxidativo con la inducción de apoptosis de Eo durante la infección con F. hepatica, indicando que la inducción de estrés oxidativo por el parásito juega un rol crucial en incrementar la muerte de Eo durante estadíos tempranos de la infección. Nosotros hipotetizamos que en respuesta a la infección con F. hepatica, Eo peritoneales aumentan su producción de DTO con el objeto de eliminar a las larvas, no obstante, estas células no resisten el estrés oxidativo generado y mueren por apoptosis.