Los plaguicidas organofosforados Fosmet y Clorpirifos, inducen la muerte celular y la producci¨®n de TNF¦Á e IL-8 en la l¨ªnea trofobl¨¢stica JEG3

GUIÑAZÚ NATALIA; RENA VIVIANA; GENTI-RAIMONDI SUSANA; RIVERO VIRGINIA; MAGNARELLI GLADIS

La Falda, Córdoba, Argentina

Otro; LV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Se ha demostrado que la célula trofoblástica placental (Tf) es capaz de secretar citoquinas, responder a ellas y producir moléculas anti-microbianas. El descubrimiento de la expresión de receptores tipo Toll en Tf plantea una visión alternativa sobre la participación de estas células en la regulación inmune materno-fetal. Considerando que sustancias tóxicas, como los plaguicidas organofosforados (OP), pueden interferir con la función placentaria en diversos niveles, el objetivo de este trabajo fue estudiar si estos compuestos modulan la viabilidad celular y la respuesta innata de Tf. Inicialmente se analizó la toxicidad de Fosmet (Pm) y Clorpirifos (Cp), OP frecuentemente aplicados en zonas agrícolas, sobre la línea celular trofoblástica JEG3, determinando la viabilidad mediante la tinción con azul de tripán. Las células se mantuvieron en cultivo por 12, 24 y 48h en la presencia, de 1, 10, 100 y 1000 µM de Fm ó Cp. Los resultados indicaron un incremento en la muerte celular dependiente del tiempo de exposición y la concentración del OP. A tiempos tempranos ambos OP (10 µM) mostraron % similares de muerte: basal (DMSO): 7±4%, Pm 22,5±5%, Cp 28±6%. En las condiciones mencionadas, también se examinó el nivel de daño celular mediante el estudio de los niveles de LDH en sobrenadantes de cultivo. Fm y Cp (10 µM) incrementaron 1,9 y 2,8 veces los niveles de LDH respecto del basal. La incubación de las células con LPS (10 µg/ml) indujo incrementos similares, mientras que con la co-incubación de OP+LPS se observaron aumentos de 3,4 veces y 3,1 veces para LPS+Pm y LPS+Cp, respectivamente. No se detectaron niveles dosables de nitritos en el medio de cultivo en ninguna de las condiciones estudiadas. Asimismo, se observó un aumento en la liberación de TNFα e IL-8 cuando las células fueron incubadas con LPS, mientras que la incubación con Fm y Cp indujo aumentos de TNFα a partir de 24h de cultivo y niveles elevados de IL-8 principalmente luego de la incubación con Cp. Se halló que la co-incubación de OP (Cp)/LPS favoreció aun más la liberación de IL-8. En conjunto estos resultados indican que Pm y Cp disminuyen la viabilidad celular de Tf, induciendo la liberación de LDH, en forma independiente de la producción de ON y favorecen la liberación de citoquinas inflamatorias, mediadores que podrían tener implicancias en la fisiopatología placentaria en embarazadas expuestas a plaguicidas.