CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Cryptococcus neoformans incrementa la expresión de moléculas MHCII y la producción de TNF alfa en eosinófilos de rata.
Autor/es:
GARRO AP; CHIAPELLO LS, BARONETTI JL; MASIH DT
Lugar:
Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología.; 2007
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
En los mecanismos de defensa de las infecciones fungicas, la producción de TNFa y óxido nítrico (ON) por células de la inmunidad innata son eventos cruciales para la resolución de la infección. Además, un aumento en la expresión en superficie de Moléculas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad clase II (MCH II) en células presentadoras de antígenos es fundamental para el dasarrollo de una respuesta inmune adaptativa. Por otra parte, durante la infección experimental en ratas con Cryptococcus neoformans realizada en nuestro laboratorio, se ha observado la presencia de eosinófilos (Eo) en los granulomas que rodean a la levadura encapsulada. Sin embargo, se desconoce la función de estas células en la criptococosis. En base a esto nos propusimos estudiar los efectos que produce el hongo vivo sobre la activación de eosinófilos peritoneales de ratas Wistar, investigando la fagocitosis, expresión de moléculas MCH II, producción de ON y TNFa. Eosinófilos de ratas se purificaron de lavados peritoneales utilizando un gradiente de percoll de densidades 1090 y 1080, luego de la inyección de los animales con tioglicolato 4 días antes. Por otra parte, levaduras de C. neoformans fueron cultivadas en sabouraud líquido durante 24 h, lavadas y opsonizadas con un anticuerpo monoclonal anti-cápsula. Los Eo se cultivaron con las levaduras opsonizadas a 37ºC y 5 % de CO2 (en una relación hongo/Eo de 2 a 1) y luego de distintos tiempos de cultivo se determinó: las levaduras intracelulares en preparados teñidos con May-Grunwald-Giemsa, la expresión de MCH II en la superficie celular (citometría de flujo) y la producción de ON (reacción de Griess) y TNF a (ELISA de captura) en los sobrenadantes de cultivo. Los resultados muestran que a las 2 h de cultivo se observan levaduras en el interior de los Eo, indicando la capacidad de estas células para fagocitar levaduras opsonizadas. Además, luego de 22 h de cultivo se observó un aumento en la expresión de MHC II en la superficie de Eo incubados con las levaduras con respecto a Eo en medio solo (p < 0,006). En los sobrenantes de los cultivos se detectó un incremento en la producción de TNFa y una disminución en los niveles de liberación de ON, respecto a los controles (p < 0,001 y p < 0,002, respectivamente). Estos resultados indican que C. neoformans es fagocitado por Eo y estas células se activan liberando TNFa y aumentando la expresión de MCH II. Sin embargo, el hongo inhibe selectivamente la liberación de la molécula microbicida ON. Estos resultados sugieren la participación de los eosinófilos en los mecanismos de defensa en la criptococosis y abren el camino para evaluar a estas células como posibles presentadoras de antígenos fúngicos.