Aldehído deshidrogenasa 1A1 en cornea de cobayos: características moleculares y localización tisular

SUAREZ MF; CORREA L; ESPOSITO E; INSFRAN C; URRETS ZAVALIA JA; SERRA HM

Buenos Aires

Congreso; AIVO; 2014

Objetivos: Queratopatía Climática Esferoidea (QCE) es una enfermedad degenerativa de la cornea humana caracterizada por la agregación de proteínas bajo el epitelio y una progresiva opacidad corneal, causada por condiciones ambientales desfavorables. En el intento por desarrollar un modelo experimental de QCE, estudiamos el efecto de agentes antioxidantes en la cornea de cobayos normales y de cobayos expuestos a radiación UV (RUV). Dado que aldehído deshidrogenasa 1A1 (ALDH1A1) contribuye a la protección contra el estrés oxidativo, decidimos estudiar los aspectos moleculares y la localización de esta enzima en la cornea de cobayos normales. Métodos: se emplearon homogenato de cornea total, así como extracto de epitelio, estroma y endotelio de cobayos. La expresión de ALDH1A1 se estudió mediante inmunoblotting e inmunofluorescencia, y la existencia de isoformas para esta enzima se determinó mediante isoelectroenfocado. Resultados: ALDH1A1 en la cornea de cobayos presenta algunas características únicas con respecto a otros mamíferos. Esta enzima tienen un peso molecular de aproximadamente 54 kDa, al igual que otra de las cristalinas presentes en cornea (ALDH3A1), previamente caracterizada molecularmente por nuestro grupo de trabajo en células epiteliales de cornea de cobayos normales. Los estudios de isolectroenfocado de ALDH1A1 revelaron la existencia de una única isoenzima con un pI de aproximadamente 9 a diferencia de las dos isoformas de la enzima ALDH3A1. Los estudios de inmunofluorescencia demostraron que estas dos enzimas (ALDH1A1 y ALDH3A1) se expresan en células epiteliales, keratocitos y células endoteliales de la cornea. Conclusiones: En este trabajo identificamos y caracterizamos molecularmente, por primera vez, la enzima ALDH1A1 en los diferentes compartimentos celulares de la cornea de cobayos normales. Además describimos su localización tisular y la comparamos con la localización de la otra cristalina (ALDH3A1).