Componentes glucídicos de antígenos de excreción-secreción de Fasciola hepatica inducen apoptosis de eosinófilos por un mecanismo dependiente de caspasas

SERRADELL, MARIANELA DEL CARMEN; GUASCONI, LORENA; MASIH, DIANA TERESA

Mar del Plata

Jornada; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología

El helminto Fasciola hepatica infecta un amplio rango de mamíferos, incluyendo al hombre. En estos hospedadores se localiza a nivel de canalículos biliares y libera durante su migración productos complejos con diversos efectos inmunomodulatorios denominados antígenos de excreción-secreción (AES). En las infecciones por helmintos los eosinófilos (Eo) representan importantes células efectoras que pueden destruir larvas de estos parásitos. No obstante, estas infecciones son enfermedades crónicas, lo cual implica que los parásitos ponen en marcha estrategias de evasión logrando sobrevivir en el hospedador. Recientemente, hemos demostrado que los AES de F. hepatica inducen apoptosis de Eo como un mecanismo de inmunosupresión. En este trabajo investigamos mecanismos intracelulares involucrados en la apoptosis, como es la activación de caspasas y estudiamos además que tipo de componentes de los AES participarían en la inducción de la muerte celular. Eo de ratas Wistar se purificaron mediante gradiente con Percoll y la apoptosis se detectó por microscopía (May Grünwald-Giemsa y Bromuro de Etidio) y por citometría (hipodiploidismo con Ioduro de propidio). La actividad de caspasas se determinó por colorimetría y su participación en la muerte celular se evaluó mediante ensayos de inhibición. Los AES se sometieron a tratamiento térmico y a oxidación con periodato. Se observó un incremento en la activación de caspasas-3, -8 y -9 inducida por AES; en presencia del inhibidor de pan-caspasa, Z-VAD-fmk, la apoptosis fue prácticamente abolida (p< 0,001). Cuando los AES se sometieron a oxidación de carbohidratos con periodato la apoptosis se vió disminuída correlativamente con la intensidad del tratamiento (p< 0,005); en tanto que el calentamiento no produjo modificaciones. Los datos demuestran que los AES de F. hepatica inducen apoptosis de Eo a través de la activación de caspasas y que glúcidos presentes en estos productos serían, al menos en parte, responsables de mediar el fenómeno.