CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación del H2O2 en la inmunotoxicidad producida por aflatoxina B1 y fumonisina B1.
Autor/es:
MARY, VS; OTAIZA GONZÁLEZ, SN; ARIAS, SL; RUBINSTEIN, HR; THEUMER, MG
Lugar:
Río Cuarto, Córdoba
Reunión:
Congreso; VII Congreso latinoamericano de micotoxicología; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Latinoamericana de Micotoxicología
Resumen:
Aflatoxina B1 (AFB1) y fumonisina B1 (FB1), son las principales micotoxinas sintetizadas por hongos de los géneros Aspergillus y Fusarium, respectivamente, por sus efectos carcinógenos e inmunotóxicos en humanos y animales. Éstas toxinas son contaminantes comunes de cereales y frecuentemente coexisten en la naturaleza, sin embargo, poco se conoce acerca de los efectos interactivos inducidos por mezclas de ambas toxinas. Objetivos: ? Estudiar la acción de AFB1, FB1 y una mezcla de ambas micotoxinas sobre la producción de citoquinas y la capacidad citolítica de células inmunes de rata. ? Determinar la participación del estrés oxidativo en los efectos inmunotóxicos inducidos por las micotoxinas. Materiales y métodos ? Cultivos de células mononucleares de bazo (CMB) y linfocitos intrahepáticos (LIH): Las células fueron obtenidas de ratas Wistar macho endocriadas (de 8 semanas de edad), y cultivadas en presencia o ausencia de 20µM AFB1, 10µM FB1 y MIX (20µM AFB1 + 10µM FB1) por 24-48 h, a 37ºC y 5% CO2. ? Identificación de diferentes poblaciones celulares mediante el análisis de marcadores de superficie celular por citometría de flujo. ? Producción de citoquinas: Los niveles de IFNγ e IL4 se determinaron, luego de 24 h de incubación, por citometría de flujo. TNFα se detectó en los sobrenadantes de cultivos de 48 h por ELISA. ? Capacidad citolítica: Se determinó la capacidad de las CMB de ?asesinar? las células blanco por la exocitosis de sus gránulos citotóxicos, luego de 48 h de cultivo, mediante el teñido de las células con e-Fluor 670 y la adquisición de las mismas en un citómetro de flujo. ? Determinación de la participación del H2O2: Las células serán cultivadas con 1000 U/mL Catalasa (enzima antioxidante que descompone el H2O2), previamente y durante la incubación con las micotoxinas. Resultados FB1 produjo un escaso o limitado efecto negativo sobre la producción y/o liberación de las citoquinas inflamatorias INFγ y TNFα, por las CMB y los LIH. Además, AFB1 redujo la producción de INFγ por los LIH, pero no afectó la producción de esta citoquina por las CMB. La acción combinada de AFB1 y FB1 indujo un efecto supresor mayor que las toxinas individuales, reduciendo la producción de las citoquinas inflamatorias en los dos tipos de células inmunes estudiadas, e incrementó la síntesis de IL4 por las células natural killer T, de manera similar a las micotoxinas individuales. Por otro lado, se observó que las micotoxinas, individuales y combinadas, disminuyeron la capacidad citolítica de las CMB, siendo más importantes los efectos inducidos por la mezcla de AFB1 y FB1. La incubación de las células con Catalasa revirtió el efecto inmunosupresor inducido por las micotoxinas individuales y especialmente por la mezcla. Conclusiones Estos resultados sugieren fuertemente que los efectos de las micotoxinas combinadas sobre la producción de citoquinas, podría polarizar la respuesta inmune adaptativa local y sistémica hacia una respuesta antiinflamatoria tipo Th2. La participación del estrés oxidativo como un mecanismo de inmunotoxicidad inducido por las micotoxinas, es principalmente evidenciado en las células expuestas a AFB1 y FB1 combinadas. En conjunto, los resultados demuestran un mayor efecto inmunotóxico inducido por la mezcla de AFB1 y FB1, que por las micotoxinas individuales, y sugieren que la acción combinada de las micotoxinas afectaría en mayor medida la inmunovigilancia antitumoral, y favorecería el escape de las células transformadas y la progresión tumoral.