Expresión de Citocromo P450 1A y p-glicoproteína en Jenynsia multidentata y su respuesta frente a lindano

GALANTI, LUCAS NICOLÁS; AMÉ, MARÍA VALERIA; PESCE, SILVIA FABIANA; WUDERLIN, DANIEL ALBERTO

Los Cocos

Simposio; 1er Simposio SETAC Argentina; 2006

SETAC

Los peces pueden reaccionar frente al estrés tóxico sintetizando enzimas de biotransformación y proteínas de estrés. Una de las enzimas involucradas en reacciones de biotransformación de fase I es la Citocromo P450. Particularmente, el aumento en una de sus isoformas, la Citocromo P450 1A (CYP1A), ha sido asociada a la detoxificación de numerosos xenobióticos. P-glicoproteína (P-gp) es una proteína de membrana involucrada en la eliminación de compuestos xenobióticos desde el interior celular. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de CYP1A y P-gp en distintos órganos de Jenynsia multidentata, pez autóctono de los ríos de Córdoba (Argentina), para luego evidenciar cambios en la expresión de estas proteínas cuando se enfrenta al individuo con un pesticida organoclorado como lindano. La expresión de CYP1A y P-gp se evaluó por RT-PCR semi-cuantitativa con primers deducidos de secuencias conservadas conocidas de lenguado (Platichthys flesus) para CYP1A y rodaballo (Scophthalmus maximus) para P-gp. Como control se utilizó la expresión de β-actina con primers diseñados a partir de la secuencia conocida de β-actina de P. flesus. Los productos de PCR obtenidos se clonaron y secuenciaron a fin de obtener la información perteneciente a Jenynsia multidentata para CYP1A y P-gp. Las secuencias encontradas mostraron un 84% de similitud con Scophthalmus maximus - AJ291813 para P-gp y 82% y 94% de similitud con Platichthys flesus AJ 310693 y AF171095 para CYP1A y β-actina respectivamente. Se evidenció expresión de P-gp en los tres órganos analizados: hígado, cerebro y branquias, y de CYP1A en hígado y branquias. Posteriormente, se realizaron las exposiciones de J. multidentata a 25 ppb de lindano por 6, 12, 24 y 48 h. Se procesaron en paralelo peces control. Se observó un aumento significativo en la expresión de CYP1A y P-gp en branquias, mientras que en hígado los productos de PCR de CYP1A y P-gp muestran un pico de expresión a las 12 h. No se observaron cambios en la expresión de P-gp en cerebro. Estos resultados evidencian que J. multidentata responde al ingreso de lindano con un aumento en la expresión de CYP1A y P-gp en hígado y branquias dependiendo la velocidad de esta respuesta del órgano en estudio. Debería evaluarse la expresión de CYP1A y P-gp de organismos naturalmente expuestos para postular a estas proteínas como posibles biomarcadores de contaminación acuática.