La expresión transiente de la E3 ubiquitina ligasa GRAIL contribuye a la hiporespuesta de células T observada durante la etapa aguda de la infección experimental con Trypanosoma cruzi

STEMPIN, C; BAIGORRI, R; CERBÁN F

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2012

Sociedad Argentina de Inmunología y Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

La ubiquitinación de proteínas mediada por E3 Ubiquitina Ligasas (E3-Ubi-Lig) es una señal indispensable que regula la tolerancia hacia antígenos propios, controlando la abundancia o localización de mediadores de señalización, restringiendo la activación y proliferación de la célula T. Sin embargo, la activación de estos mecanismos ha mostrado ser perjudicial durante el curso de infecciones crónicas. Una de las E3-Ubi-Lig involucrada en hiporespuesta de células T durante infecciones es Gene Related to Anergy in Lymphocytes (GRAIL). Dado que en la enfermedad de  Chagas se observa una disfunción en las células T, investigamos la participación de la E3-Ubi-Lig GRAIL en la infección experimental con T. cruzi. Para ello, ratones BALB/c se infectaron i.p. con 500 tripomastigotes. A distintos días post infección (15, 21, 28, 36 d.p.i) se prepararon suspensiones de células mononucleares de bazo (CMB). Se evaluó por citometría de flujo el número de células CD3+ y la respuesta proliferativa, a través de la marcación con CFSE, en respuesta a anti-CD3, anti-CD3 más anti-CD28 y PMA más Ionomicina. Además se midió en estas células la expresión de GRAIL por Western blot y por PCR en tiempo real. En cada ensayo se incluyeron CMB de animales controles no infectados. Las CMB de animales controles proliferaron frente a los estímulos utilizados, sin embargo en las CMB de animales infectados se observa menor respuesta proliferativa en respuesta a los estímulos a los 15 y 21 d.p.i. La respuesta proliferativa se recupera entre los 28 y 36 d.p.i. La expresión de GRAIL por Western blot se detectó a los 15 y 21 d.p.i mientras que no se observó expresión a tiempos más tardíos. Cuando se evaluó por PCR en tiempo real mostró un aumento significativo a los 15 d.p.i (p < 0.01) y 21 d.p.i (p < 0.05). Por lo tanto, la expresión de E3-Ubi-Lig durante la infección por T. cruzi podría contribuir con otros mecanismos ya descriptos, para favorecer la inmunosupresión observada en la enfermedad de Chagas.