Participación de la vía de señalamiento de IGF-1 en la actividad del promotor y el nivel de expresión del factor de transcripción ZEB1

PERRONE A; LLORENS DE LOS RIOS C; CAVALLO N; CABANILLAS, ANA MARIA

Mar del Plata, Buenos Aires.

Congreso; LVII Reunion Cientifica Anual Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC).; 2012

SAIC

ZEB1 es un factor de transcripción (FT) involucrado en la diferenciación celular y metástasis tumoral, el cual actúa como represor de varios genes entre los que se encuentra su propio promotor. Al igual que para muchos otros FT, se piensa que más de una vía de señalización intracelular participa en la regulación génica y modificación postraduccional del mismo en respuesta a cambios del medio ambiente celular. Entre las vías propuestas como reguladoras de ZEB1 se encuentran PI3K/Akt y MEK/ERK, ambas gatilladas por IGF-1. Nuestro objetivo es determinar el rol de la señal IGF-1 en la regulación del promotor de ZEB1 y la contribución de las vías mencionadas anteriormente a tal efecto. Las líneas celulares HEK 293T (baja o nula expresión de ZEB1) y CHO-K1 (expresión isoforma hipofosforilada) se transfectaron con el vector de expresión de ZEB1 y un fragmento de 1000pb del promotor del gen ZEB1 acoplado a luciferasa como gen reportero. Posteriormente las células fueron tratadas con los inhibidores LY294002 (de PI3K), PD98059 (de ERK), NVP (del receptor de IGF-1) y sometidas al estímulo con IGF-1 en una concentración y tiempo de incubación predeterminados óptimos para inducir al promotor de ZEB1, obtenidos previamente a través de una curva dosis-efecto. Los valores de luciferasa demostraron incremento en la actividad transcripcional del promotor luego del estímulo con IGF-1, que disminuyó moderadamente por efecto de LY y marcadamente con NVP. Concluimos que la actividad de las vías de IGF-1 podrían jugar un rol importante como inductoras del promotor de ZEB1, ya que la inhibición de la misma revierte fuertemente el efecto de IGF-1. Así mismo, de las dos vías activadas por dicho factor, la de PI3K/Akt estaría más comprometida en la sumatoria de efectos de la vía, aún cuando no se puede descartar la participación de MEK/ERK.