CRUZIPAíNA, UN ANTíGENO INMUNODOMINANTE DEL TRYPANOSOMA CRUZI, INDUCE EL ESTALLIDO RESPIRATORIO E INCREMENTA LA EXPRESIóN DE TLR2 EN ESPLENOCITOS DE RATONES C57BL/6

GUIÑAZÚ NATALIA, BECERRA CECILIA, PELLEGRINI ANDREA, CARRERA-SILVA ANTONIO, CANO ROXANA, ALBESA INES, GEA SUSANA

Mar del Plata-Argentina

Jornada; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología

  Previamente reportamos que la inmunización con cruzipaína (Cz), desprovista de actividad enzimática, induce en la cepa C57BL/6 (B6) un perfil Th1 con activación clásica de macrófagos, mecanismo que controla la infección parasitaria. Considerando que las especies reactivas del oxígeno (ROS) y receptores de la inmunidad innata como los tipo toll (TLRs) son claves en la defensa contra parásitos, estudiamos si Cz es capaz de inducir el estallido respiratorio y la expresión de TLR2 y/o TLR4 en células totales de bazo (CTB). Se utilizaron ratones B6 inmunizados con Cz+CFA (GI), OVA+CFA (GC) y normales (GN). El estudio de la producción de ROS por quimioluminiscencia utilizando luminol reveló que Cz exógena induce el estallido respiratorio en CTB obtenidas en fresco de todos los grupos de ratones, GN: 24.65±2.01; GC: 28.23±1.73; GI: 31.41±2.28 unidades relativas de luz (URL). Los valores basales con luminol fueron GN: 3.23±0.45; GC: 6.81±1.62, GI: 9.58±1.5 URL. Cuando CTB fueron estimuladas por 2h con Cz se observó un aumento en la producción de ROS (relación URL Cz/medio) de 8,3 veces para el GI y 6,6 veces para el GC. La co-incubación con superoxido dismutasa, catalasa o L-NMMA disminuyó parcialmente la producción de ROS, mientras que el agregado de tirón -scavenger del anión superoxido- la neutralizó totalmente. Además, se observó por citometría de flujo un incremento en el porcentaje de esplenocitos TLR2+ en el GI luego de la estimulación con Cz vs medio, 27±2 vs 15±2 % (p< 0.05) y en células F4/80+ TLR2+, 83±1 vs 57±4 % (p< 0.05). Se reveló por Western blot un aumento de TLR2 a las 24h post cultivo con Cz mientras que la expresión de TLR4 no sufrió cambios significativos en los tiempos estudiados. En conclusión, Cz induce la producción de ROS en CTB de todos los grupos estudiados y favorece la expresión de TLR2 en esplenocitos del GI. Este receptor potenciaría el estallido respiratorio y sería un eslabón entre la inmunidad innata y adaptativa.