Células epiteliales de próstata humana expresan TLR4 y responden a un estimulo inflamatorio activando NF-kB.

GERARDO GATTI, VIRGINIA RIVERO, MARIANA MACCIONI.

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual Conjunta de la Sociedad Argentina de Inmunologia- Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas. Mar del Plata. Noviembre 2006; 2006

Trabajos previos en nuestro grupo demuestran que la línea epitelial de próstata de rata, MAT-LU, expresa TLR4 y CD14 intracelularmente y no en la superficie. Aún así, es capaz de responder al LPS, activando genes de quemoquinas, induciendo iNOS y secretando óxido nítrico. El objetivo del presente trabajo fue evaluar si las células epiteliales prostáticas humanas responden de forma similar a un estímulo inflamatorio clásico como es el LPS bacteriano. Con ese fin, se analizó por citometría de flujo y RT-PCR si la línea celular de próstata humana DU 145 expresa TLR4 y CD14. Pudimos observar que células DU 145 expresan los transcriptos de TLR4 y CD14 y también las proteínas correspondientes a los mismos. Al ser estimuladas con LPS, las células DU 145 responden activando NF-kB e incrementando la expresión del transcripto de IL6. Debido a que la localización de TLR4 intracelular supone una internalización del LPS para que se inicien así las señales de activación, se realizaron experimentos de captación del mismo, utilizando LPS-Alexa488 y midiendo la fluorescencia captada a distintos tiempos por citometría de flujo y microscopía. Se observó la presencia de células DU145 y MAT- LU LPS Alexa488+ a partir de los 30 min de incubación. Cuando los mismos experimentos se realizaron en ausencia de suero bovino fetal, fuente de CD14 soluble, el porcentaje de células LPS Alexa488 + disminuyó en un 50% para ambas líneas. Futuros experimentos se diseñarán con el objetivo de conocer el sitio de reconocimiento e inicio de la señalización de LPS-TLR4.en ambas líneas epiteliales. Nuestros resultados indican que las células epiteliales prostáticas humanas, DU 145, presentan un fenotipo susceptible al LPS ya que expresan TLR4 y CD14, pudiendo así actuar como sensores tempranos en una infección.