LA ACTIVACIÓN VÍA TLR DE CÉLULAS TUMORALES NO REVIERTE LA ACUMULACIÓN DE CÉLULAS Gr1+CD11b+ OBSERVADA AL DIFERENCIAR IN VITRO CÉLULAS DENDRÍTICAS EN PRESENCIA DE SOBRENADANTES TUMORALES.

DAVID ANDRÉS NOCERA; NICOLÁS G NÚÑEZ; GERARDO GATTI; VIRGINIA ANDREANI; VIRGINIA RIVERO; MARIANA MACCIONI

Tucumán

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Sociedad Argentina de Inmunología

Diferentes factores solubles secretados por células tumorales generan una diferenciación defectuosa de progenitores mieloides (PMs) a células dendríticas (CDs), acumulándose células mieloides supresoras (MS). Nuestros resultados previos demuestran que sobrenadantes (SN) de células B16 estimuladas con distintos agonistas de receptores tipo Toll (TLRs) revierten parcialmente la inhibición de la maduración de CDs ya diferenciadas, aumentando la expresión de CD40, CD80, CD86 y MHC clase II. En este trabajo, evaluamos si factores presentes en SN-B16 estimuladas vía TLR3 y 4 pueden revertir la acumulación de MS durante la diferenciación de PM a CDs de ratón. Sobrenadantes (SN) de células B16 cultivadas sin estímulo (SN-B16); 48hs con 10 μg/ml de monofosforil lípido A (SN-MPLA); 4hs con liposoma-poliAU (2μg/ml) -exhaustivamente lavadas con PBS para eliminar trazas de pAU- y luego de 44hs adicionales (SN-pAU) o de células NIH3T3 como control (SN-NIH3T3) fueron adicionados al 30% en medio de diferenciación con GM-CSF y 4,5 106 de PM obtenidas de médula ósea de ratones TLR4lps-del. Se cosecharon las células a distintos días (0, 3, 6 y 8) y se analizaron los marcadores CD11c, CD11b y Gr1 mediante citometría de flujo. Al octavo día se obtuvo un 80% de células CD11c+ CD11b+ con SN-NIH3T3, mientras que con SN-B16, SN-MPLA y SN-pAU se obtuvo un 36,9 , 34,8 y 34,4 % (p=ns); Los porcentajes de células GR1+ CD11b+ en SN-MPLA, SN-pAU y SN-B16 fueron siempre mayores a los obtenidos cuando la diferenciación se realizó en presencia de SN-NIH3T3 (6,7; 6,7; 8,4 y 2,5 % respect.), indicando que factores solubles secretados por células tumorales activadas por TLRs, si bien mejoran la maduración de CDs no inciden en la diferenciación in vitro de CDs a partir de PMs de ratones C57.