CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Fagocitosis y muerte intracelular del patógeno oportunista Candida albicans por células de la glía
Autor/es:
PERALTA-RAMOS, MJ, MIRÓ, MS; MAYOL, GF; FIGUEREDO, CM.; ICELY PA; SOTOMAYOR, CE.
Lugar:
Tucuman
Reunión:
Congreso; 23. LIX Reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología, 19 al 21 de Octubre de 2011, Tucumán; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina Inmunologia
Resumen:
En infecciones en SNC, la glía ejerce un rol clave en el control del patógeno. A pesar de la elevada incidencia y marcada mortalidad observada durante la neurocandidiasis, poco se conoce sobre el rol de éstas células frente a C. albicans (Ca). El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad fagocítica y microbicida de las células gliales frente a Ca. Para ello, cultivos primarios provenientes de ratones C57Bl/6, compuestos en un 80% por Astrocitos (As) y un 8% por Microglía (Mi), se cultivaron con levaduras viables en una relación patógeno:célula huésped de 1:1 y 5:1 en condiciones basales, en presencia de opsoninas séricas (10%) o luego de la estimulación simultánea con TNF-α recombinante (10ng/ml). La respuesta se evaluó luego de 0.5, 1, 2, 12 y 24h de incubación con el hongo. Para la determinación de la capacidad fagocítica, las levaduras fueron conjugadas con FITC, los núcleos celulares contracoloreados con DAPI y evaluados ambos mediante microscopía de contraste de fase e IF. A partir de las 0.5h se detectó actividad fagocítica y luego de 1h fue visible la emisión de pseudomicelio. El uso de anticuerpos para As (GFAP+) y Mi (CD11b+) y de microscopía confocal confirmó la localización intracelular de Ca. Células CD11b+ presentaron un elevado grado de vacuolización de su citoplasma y el número de levaduras fagocitadas por célula osciló entre 5-15 luego de 1h. La capacidad fungicida, evaluada mediante el método de dilución en placa y recuento de UFC, fue máxima a 1-2h con valores entre 79-83% para la relación 1:1. La presencia de opsoninas o TNF-α no modificó significativamente éste parámetro. Los estudios a las 12 y 24h evidenciaron el crecimiento del hongo y la incapacidad de la glía de controlar al mismo. Este trabajo demuestra la habilidad de la Mi de fagocitar y matar a Ca a tiempos tempranos y aporta el desarrollo de un modelo apropiado para evaluar la interacción patógeno-huésped a fin de explorar la reactividad inmune glial contra éste hongo.