CIBICI   14215
CENTRO DE INVESTIGACION EN BIOQUIMICA CLINICA E INMUNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Respuesta In Vitro de células epiteliales frente a Candida albicans
Autor/es:
MIRÓ MS; ICELY PA; SOTOMAYOR CE
Lugar:
Tucuman
Reunión:
Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunologia
Resumen:
Respuesta In Vitro de células epiteliales frente a Candida albicans. Miro, María S; Icely, Paula A; Sotomayor, Claudia E CIBICI-CONICET. Facultad de Ciencias Químicas. Universidad Nacional de Córdoba. Haya de la Torre y Medina Allende. Ciudad Universitaria. E-mail: smiro@mail.fcq.unc.edu.a Candida albicans es un hongo oportunista, cuyo hábitat natural son las superficies mucosas de su hospedador. Las células epiteliales constituyen una barrera activa donde la estimulación inmunológica constante requiere de un fino balance entre tolerancia e inmunidad. El daño de esta barrera define el pasaje de los patógenos a los tejidos y el inicio de la diseminación. Con el objetivo de evaluar la interacción temprana entre C.albicans y las células epiteliales se efectuaron diferentes ensayos empleando células epiteliales humanas de línea HeLa (2x104cel/well) y C.albicans(ATCC 36801) en diferentes relaciones patógeno/célula (0,5:1; 1:1; 5:1; 10:1; 20:1). Luego de 2, 4 y 24h de contacto se evaluó: crecimiento de las células en cultivo mediante la técnica de MTT, daño citoplasmático por la liberación de la enzima lactatodehidrogenasa (LDH), generación de derivados tóxicos del oxigeno y del nitrógeno (ROS y ON) y producción de IL-1, TNF- e IL-8 (ELISA). A las 2 y 4h y a todas las relaciones ensayadas, no se detectó daño de la célula epitelial. A las 24h, la observación microscópica y la prueba de MTT revelaron la presencia del morfotipo hifal y un marcado crecimiento fúngico. A este tiempo y a la relación 20:1, la liberación de LDH fue significativa (p<0,05). A lo largo del estudio cinético no se detectaron niveles significativos de ROS y ON luego del contacto con el hongo. La producción de IL-8 por la célula epitelial es considerada un marcador de activación y un evento clave para el reclutamiento de PMN. Niveles significativos de esta citoquina se detectaron luego de 24h de cultivo y a partir de la relación patógeno/célula 5:1(p<0,05). No se observaron cambios en la producción de IL-1 y TNF- Estos resultados evidencian la existencia de una relación particular entre hongo/célula HeLa, caracterizada por un determinado tiempo de contacto, una carga fúngica elevada y un morfotipo predominante, a partir de la cual se induce la activación de la célula epitelial. Candida albicans, celulas epiteliales, mediadores inmunes es un hongo oportunista, cuyo hábitat natural son las superficies mucosas de su hospedador. Las células epiteliales constituyen una barrera activa donde la estimulación inmunológica constante requiere de un fino balance entre tolerancia e inmunidad. El daño de esta barrera define el pasaje de los patógenos a los tejidos y el inicio de la diseminación. Con el objetivo de evaluar la interacción temprana entre C.albicans y las células epiteliales se efectuaron diferentes ensayos empleando células epiteliales humanas de línea HeLa (2x104cel/well) y C.albicans(ATCC 36801) en diferentes relaciones patógeno/célula (0,5:1; 1:1; 5:1; 10:1; 20:1). Luego de 2, 4 y 24h de contacto se evaluó: crecimiento de las células en cultivo mediante la técnica de MTT, daño citoplasmático por la liberación de la enzima lactatodehidrogenasa (LDH), generación de derivados tóxicos del oxigeno y del nitrógeno (ROS y ON) y producción de IL-1, TNF- e IL-8 (ELISA). A las 2 y 4h y a todas las relaciones ensayadas, no se detectó daño de la célula epitelial. A las 24h, la observación microscópica y la prueba de MTT revelaron la presencia del morfotipo hifal y un marcado crecimiento fúngico. A este tiempo y a la relación 20:1, la liberación de LDH fue significativa (p<0,05). A lo largo del estudio cinético no se detectaron niveles significativos de ROS y ON luego del contacto con el hongo. La producción de IL-8 por la célula epitelial es considerada un marcador de activación y un evento clave para el reclutamiento de PMN. Niveles significativos de esta citoquina se detectaron luego de 24h de cultivo y a partir de la relación patógeno/célula 5:1(p<0,05). No se observaron cambios en la producción de IL-1 y TNF- Estos resultados evidencian la existencia de una relación particular entre hongo/célula HeLa, caracterizada por un determinado tiempo de contacto, una carga fúngica elevada y un morfotipo predominante, a partir de la cual se induce la activación de la célula epitelial. Candida albicans, celulas epiteliales, mediadores inmunes