Respuesta de las células de la inmunidad innata en Sistema Nervioso Central frente a Candida albicans

PERALTA RAMOS JM; FIGUEREDO CM; RENNA MS; ICELY P; SOTOMAYOR CE

Misiones

Congreso; XII Congreso Argentino de Micología; 2011

Asociacion Argentina de Micologia

Durante el proceso de diseminación Sistémica C. albicans puede colonizar Sistema Nervioso Central dando origen a una Neurocandidiasis. En nuestro laboratorio hemos desarrollado un modelo in Vivo y otro in Vitro a fin de evaluar el rol de las células de la inmunidad innata frente a este patógeno. En cerebro las células gliales astrocitos (As) y microglía (Mi) son las encargadas del reconocimiento de los patógenos y de llevar a cabo las funciones inmunes.El objetivo del presente trabajo fue evaluar la reactividad de las células de la inmunidad innata frente a C. albicans en un modelo in Vivo e in Vitro estudiando la producción local de citoquinas durante el curso de la neurocandidiasis y la actividad fagocítica de los As y Mi frente a este patógeno.Ratones de la cepa C57BL/6L fueron infectados con 1.105 levaduras viables por vía intravenosa. A las 4, 12, 14, 48 y 72 h los animales fueron sacrificados y se obtuvieron muestras de sangre, riñón y cerebro para los diferentes estudios. La carga fúngica fue evaluada por el recuento de UFC, la visualización del patógeno a nivel cerebral y la respuesta inflamatoria asociada a su colonización fue evaluada en secciones de cerebro teñidas con Hematoxilina Eosina y doble impregnación Cupro-Argéntoca de Del Río Hortera. La producción de citoquinas se determinó en el sobrenadante de los homogenatos de cerebro obtenidos a los distintos días de la cinética, empleando la técnica de ELISA. Para los estudios de actividad fagocítica, se emplearon cultivos primarios de células gliales en los que el porcentaje de As y Mi se avaluó por citometría de Flujo. Las células fueron incubadas con levaduras viables de C. albicans en relación 5:1 y la actividad fagocítica se avaluó a los 30, 60, 120 min. La identificación de las estirpes celulares con capacidad fagocítica se efectuó con usando C. albicans conjugadas a FITC y Ac específicos de As (GFAP) y Mi (CD11b) y microscopia de fluorescencia confocal.El recuento de UFC en sangre, riñón y cerebro evidenció una funguemia transitoria y una temprana colonización cerebral (4h), alcanzando valores elevados a las 72h de estudio. Ambos morfotipos fúngicos se visualizaron en el parénquima cerebral rodeados de infiltrados inflamatorios. Micriabscesos y macroabscesos se visualizaron próximos a la vasculatura. La producción local de IL-1 y TNF-alfa mostraron fluctuaciones alcanzando valores significativos a las 72h (p