Estudio de la participación de PD-L2 durante la infección con Trypanosoma cruzi.

DULGERIAN LR,; GARRIDO VV,; STEMPIN CC,; CERBAN FM.

Ascochinga, Córdoba, Argentina

Congreso; XXIV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

Sociedad Argentina de Protozoología

Los macrófagos (Mf) son células de la inmunidad innata a los cuales se les adjudica una participación importante durante la infección con T. cruzi. Estas células son activadas alternativamente cuando son infectadas por T. cruzi, lo cual se manifiesta con un aumento en la producción de IL-10, en la actividad de arginasa y una disminución en la producción de óxido nítrico (NO), favoreciendo de este modo la replicación parasitaria. Con el objetivo de estudiar posibles interacciones celulares que regulan la inducción de arginasa y que tengan influencia en el control y/o persistencia de la infección con T. cruzi, previamente demostramos que PD-L2 aumenta su expresión en Mf peritoneales durante la fase aguda de la infección y que el bloqueo de PD-L2 con anticuerpos genera un aumento en la replicación parasitaria. Para dilucidar los mecanismos mediante los cuales PD-L2 participa en la infección con T. cruzi, nos propusimos evaluar el rol de PD-L2 sobre el balance iNOS/arginasa in vitro e in vivo durante la infección con T. cruzi. Para ello, la actividad y expresión de arginasa I fue determinada en células peritoneales de ratones BALB/c tratadas con anticuerpos bloqueantes contra PD-L2 e infectadas in vitro durante 72 hs. La actividad y expresión de arginasa I se vieron incrementadas, mientras que la producción de nitritos, evaluada en los sobrenadantes de cultivo, y la expresión de iNOS disminuyeron durante el bloqueo de PD-L2. Para evaluar el rol de PD-L2 in vivo, células peritoneales de ratones PD-L2 knock out (KO) y de ratones wild-type (WT) fueron extraídas e infectadas in vitro con T. cruzi y la actividad de arginasa y la producción de nitritos fueron determinadas luego de 72 hs. La actividad de arginasa en células peritoneales PD-L2 KO se vio incrementada con respecto a las células de los ratones WT, mientras que la producción de nitritos disminuyó. De este modo, confirmamos los resultados obtenidos mediante la utilización de anticuerpos bloqueantes para PD-L2. Posteriormente, para evaluar el rol de PD-L2 in vivo, los ratones fueron infectados con 1000 tripomastigotes por vía intraperitoneal y la parasitemia fue evaluada a distintos días post infección. El número de parásitos circulantes en los ratones PD-L2 KO fue significativamente mayor que en los ratones WT durante la etapa aguda de la infección con T. cruzi. Estos resultados sugieren que PD-L2 regula el balance iNOS/arginasa durante la infección con T. cruzi controlando de este modo el progreso de la infección parasitaria.