PAPEL DO ÁCIDO LIPOICO NA MODULAÇÃO DA EXPRESSÃO DA GLICOPROTEÍNA P, ATIVIDADE DE DETOXIFICAÇÃO E ACUMULAÇÃO DO INSETICIDA ORGANCOCLORADO ENDOSULFAN NO PEIXE JENYNSIA MULTIDENTATA (ANABLAPIDAE)

MONSERRAT, JOSÉ MARÍA; VENTURA LIMA, J.; LONGARAY GARCÍA, M; AMÉ, MARÍA VALERIA; WUNDERLIN, D.A; GONZALEZ, M.; BALLESTEROS, M.L.; MIGLIORANZA, K.

Bombinhas

Congreso; XI Congresso Brasileiro de Ecotoxicologia, Bombinhas-Brasil; 2010

O fator de transcrição Nrf2 modula a expressão de genes associados às defesas antioxidantes e enzimas de fase II (glutationa-S-transferase, GST) e III (glicoproteína p, Pg-p). Antioxidantes como o ácido lipóico (AL) promovem a migração nuclear deste fator, o que leva a um aumento da capacidade antioxidante e de realizar reações de fase II e III. O trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do AL na expressão da Pg-p, atividade GST e acumulação de endosulfan (END) em diferentes órgãos do peixe Jenynsia multidentata. Foram utilizadas 120 fêmeas (1,55±0,07 g) alimentadas durante 8 dias com uma ração comercial (Tetracolor) enriquecida ou não com AL. A concentração de AL na ração foi de 4 g/Kg, determinada por HPLC com espectrometria de massa em acoplada. Foram definidos quatro grupos experimentais: controles (com ou sem pré-tratamento ao AL) e expostos (com ou sem pré-tratamento ao AL) ao END (formulação comercial; 1,4 µg/L) durante 24 h. Após a exposição os organismos foram sacrificados e os órgãos (cérebro e fígado) imersos em solução de guanidina, tiocianato de amônio e felon. Após foi extraído o RNA total, se obtendo a seguir o cDNA com oligo-DT15 como iniciadores da reação. Logo foi analisa a expressão do mRNA da Pg-p por PCR em tempo real. A atividade da GST foi determinada por espectrofotometria e a concentração de endosulfan e da forma sulfatada mais tóxica foram avaliadas por cromatografia gasosa. Os resultados mostraram que o AL induziu um aumento significativo (p<0,05) de 38% no fígado em relação aos alimentados sem o AL. A exposição ao END não alterou estas respostas (p>0,05). No cérebro não foi constatado efeito do AL nem do END na expressão da Pg-P (p>0,05). A capacidade de detoxificação foi aumentada no fígado dos expostos ao AL ou END (p<0,05). O AL promoveu um aumento das formas parentais do END (p>0,05), enquanto que as formas sulfatadas não foram diferentes nos organismos expostos ao END e previamente tratados ou não com AL. Se conclui que o AL induziu o efeito esperado em termos de respostas de fase II e III, enquanto que influenciou positivamente a acumulação de END. No entanto a metabolização deste a sua forma sulfatada mais tóxica não foi facilitada.