IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Una nueva NADP(H) deshidrogenasa de Xanthomonas citri subsp. citri involucrada en la tolerancia al estrés salino y oxidativo
Autor/es:
GOTTIG, NATALIA; BARCAROLO, MARÍA VICTORIA; JORGELINA OTTADO; BETIANA S. GARAVAGLIA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XIV Congreso Argentino de Microbiología General (XIV SAMIGE); 2019
Resumen:
Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) es el agente causal de la cancrosis de los cítricos, enfermedad mundial que afecta a variedades cítricas provocándoles una disminución en la producción y calidad de los frutos. Durante el ciclo de vida de Xcc como epífita sobre la superficie del tejido vegetal, está expuesta a condiciones ambientales desfavorables entre ellas, baja disponibilidad de agua y estrés osmótico. En un estudio de proteómica realizado previamente evaluamos la adaptación de Xcc en condiciones de estrés salino generado por NaCl 0,25 M. Una proteína homóloga a una NAD(P)H deshidrogenasa (DH), presentó una abundancia de 30 veces en bacterias sometidas a estrés salino. El objetivo de este trabajo consiste en dilucidar la función de la proteína DH en la interacción planta-patógeno y en la adaptación de Xcc en condiciones de estrés salino y oxidativo. Mediante qRT-PCR evaluamos los niveles de expresión de la DH y, para caracterizar la funcionalidad de esta proteína generamos una mutante, {XccDH-} por doble evento de recombinación y se complementó conjugando pBBR1MCS-2:DH, {XccDH-c}. A través de curvas de crecimiento evaluamos el comportamiento de las bacterias en NaCl 0; 0,25 y 0,5 M. Para analizar la participación de la DH en la tolerancia a estrés oxidativo, incubamos las bacterias en H_20_2 25 mM. La acumulación de especies reactivas del oxígeno (ROS) en los extractos bacterianos luego del tratamiento con H_20_2 25 mM, NaCl 0,25 y 0,5 M, se cuantificaron utilizando la sonda fluorescente diacetato 2?,7?-diclorodihidrofluoresceína (H_2DCFDA) y mediante el ensayo de ?sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico? (TBARS).Al evaluar los niveles de expresión de la DH en NaCl 0,25 M observamos una inducción de 3.3 veces (p