Regulación de un transportador tipo ABC de Staphylococcus aureus por el sistema de dos componentes SAOUHSC01313-SAOUHSC01314 en respuesta a cambios de temperatura

DIAZ, A. R.; DE MENDOZA, D; MANSILLA, MC

Rosario

Jornada; VI Jornada de Ciencia y Tecnología UNR; 2012

Univ. Nac. de Rosario

Staphylococcus aureus, una bacteria Gram +, es un frecuente componente de la microbiota humana que puede volverse un patógeno peligroso. Las cepas de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) son prevalentes en los hospitales. Recientemente, el surgimiento de infecciones en la comunidad asociadas a MRSA en personas sin patologías previas ha aumentando la preocupación en Salud Pública. La patogenicidad de S. aureus está causada por la expresión de una miríada de factores de virulencia, cuya activación en respuesta al medio ambiente del hospedador puede proveer una ventaja para su supervivencia. Un rápido cambio en la temperatura puede ser una señal para el patógeno de que se encuentra dentro del hospedador, y así inducir la expresión de genes relacionados a la virulencia. Debido a que los sistemas de dos componentes (TCS) permiten a las bacterias sensar las señales ambientales, nos propusimos estudiar dos genes contiguos en el cromosoma de S. aureus NCTC 8325, SAOUHSC 01313 y SAOUHSC 01314, que codifican para una putativa histidina quinasa (HK) y su regulador de respuesta (RR), respectivamente. Estas proteínas son homólogas al TCS DesK-R de B. subtilis, que regula la transcripción del gen de la desaturasa ante cambios en la fluidez de la membrana. Corriente arriba y adyacente a los genes que codifican el TCS se encuentran los genes SAOUHSC 01311- SAOUHSC 01312 que codifican para un putativo transportador ABC. Notablemente, estos genes presentan en su promotor una secuencia regulatoria idéntica a la secuencia regulatoria del gen des. El objetivo del presente trabajo fue determinar si la señal percibida por el TCS SAOUHSC01313-01314 media la activación de la transcripción de los genes que codifican para el putativo ABC transportador SAOUHSC 01311-01312.Mediante medidas de actividad β-galactosidasa, usando una fusión reportera Pdes-lacZ, pudimos determinar que la HK de S. aureus, SAOUHSC 01313, restaura la capacidad de una cepa de B. subtilis desK- de activar la transcripción de des después de una inducción por shock frio. Además, hallamos que en una mutante desKR- también se activa la transcripción de des cuando SAOUHSC 01313-01314 se expresan bajo un promotor condicional. Estos resultados indican que la HK de S. aureus respondería a las mismas señales percibidas por DesK. Para evaluar si SAOUHSC 01313-01314 está involucrado en la regulación de la transcripción del transportador ABC realizamos medidas de actividad  β-galactosidasa en una cepa de B. subtilis desKR- que contiene clonado en el locus amyE una fusión transcripcional del promotor de SAOUHSC 01311 a lazZ (Psa01311-lacZ). Encontramos que la expresión de SAOUHSC01313-01314 bajo un promotor condicional activa la transcripción de Psa01311-lacZ, indicando que el TCS de S. aureus, sin necesidad de otros factores, regula la expresión del transportador ABC.