EL GEN DE PATOGENICIDAD PTHA DE XANTHOMONAS ES NECESARIO PERO NO SUFICIENTE PARA EL DESARROLLO DE LA CANCROSIS BACTERIANA DE LOS CÍTRICOS EN LIMONERO.

CHIESA M.A.; FAVARO M.A.; PINO DELGADO N.; SICILIANO M. F.; CASTAGNARO A. P. ; MARANO M.R.

Sede de la Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Santa Fe, Argentina

Jornada; IVJornadas de Ciencia y Técnica (C y T de la Universidad Nacional de Rosario, UNR); 2010

Universidad Nacional de Rosario

La Cancrosis Bacteriana de los Cítricos (CBC) es una enfermedad de importancia a nivel económico en la citricultura mundial. Además, por ser una enfermedad cuarentenaria, su manejo es prioritario en la provincia de Tucumán, en el NO de nuestro país, siendo esta región la primera productora mundial de limones (Citrus limon). Es notable que la mayoría de los cultivares comerciales de cítricos son moderada a altamente susceptibles a la bacteria fitopatógena Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc), causante de la CBC. El gen de virulencia pthA es responsable de inducir la hipertrofia e hiperplasia celular características de los síntomas de la enfermedad y todas las cepas de Xanthomonas que causan cancros hiperplásicos en cítricos poseen múltiples alelos de este gen. Previamente ha sido caracterizado por nuestro grupo de trabajo un aislamiento de Xanthomonas obtenido de mandarinas (Citrus reticulata Blanco) con síntomas característicos de la CBC. Este aislamiento (Xcc44), caracterizado bioquímica y molecularmente, pertenece a la especie Xcc. Sin embargo, el mismo induce una respuesta tipo HR (respuesta hipersensible) en hojas de C. limon y cancros inmaduros en C. aurantifolia (lima mexicana). El perfil genómico de Xcc44 comparado con la cepa de referencia XccT2 y usando el gen pthA como sonda, mostró diferencias en el número y tamaño de los alelos de pthA, sugiriendo que dicha cepa no posee alelos funcionales de este gen. El objetivo principal de este trabajo es determinar si el gen pthA suprime la respuesta de defensa inducida por Xcc44 en limonero. Para ello, se transformó Xcc44 con el plásmido pLpthAposi3 que contiene un alelo funcional del gen de virulencia pthA; y posteriormente con el plásmido pMp2444 el cual contiene el gen de la proteína verde fluorescente (GFP). Se realizaron ensayos de patogenicidad con la cepa Xcc44-pthA-GFP en distintas especies cítricas. Si bien en la interacción Xcc44pthA- C. limon se observa la aparición de cancros, los mismos no son de las características observadas en la interacción XccT2- C. limon. No obstante, en la interacción Xcc44pthA- C. aurantifolia los síntomas observados son similares a los observados en la interacción XccT2- C. aurantifolia. Además, se analizó el desarrollo de biofilm bacteriano sobre la superficie de hojas de cada una de estas especies vegetales en estudio a través de microscopía de escaneo láser confocal (CLSM). Los resultados obtenidos indicarían que en la respuesta de defensa tipo HR inducida en la interacción específica Xcc44- C. limon estarían involucrados otro/s componentes bacterianos, del tipo supresor de virulencia, previamente caracterizados en Xanthomonas. Un análisis completo del genoma de dicha bacteria será de utilidad para encontrar las diferencias fundamentales involucradas en la virulencia disminuida de la misma y a su vez el estudio del transcriptoma de limonero en la interacción específica con Xcc44 permitirá dilucidar los mecanismos de defensa activados particularmente en la planta.