CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

En los túbulos colectores (TC) del riñón de mamífero la presencia de gradientes osmóticos y la acción de la hormona antidiurética inducen una importante reabsorción de agua desde la luz al intersticio. Lo cual implica cambios en el volumen celular y en la activación de mecanismos de regulación de volumen. Nuestros trabajos previos mostraron en células de TC sometidas a un shock hipotónico, que la presencia de la AQP2 en la membrana apical es fundamental para producir un aumento de calcio intracelular, necesario para una rápida activación de los mecanismos de regulación de volumen (RVD). El aumento de Calcio y el RVD son inhibidos por el rojo de rutenio y por gadolinio, ambos compuestos inhibidores del TRPV4. El objetivo de este trabajo fue investigar si existe algún tipo de interacción entre AQP2 y TRPV4 en respuesta a hipotonía. Para ello realizamos estudios moleculares (inmunofluorescencia) y funcionales (videomicroscopía de fluorescencia) para estudiar la localización y los cambios en la concentración de calcio y en el volumen celular en respuesta a hipotonía en 2 líneas celulares de túbulo colector de rata WT-RCCD1 (no expresan AQP2) y AQP2-RCCD1 (transfectadas con AQP2). Nuestros resultados mostraron que en condiciones de isotonía el TRPV4 se distribuye en el compartimiento intracelular en ambas líneas celulares. Sin embargo en condiciones hipotónicas el TRPV4 se transloca a la membrana celular sólo en las células que expresan AQP2. Al incubar estas células con colchincina se inhibió el aumento de calcio en respuesta a hipotonía y el RVD. Experimentos de inmunofluoresencia mostraron que la colchincina también inhibió la translocación de TRPV4 a la membrana. En presencia de HgCl2, un inhibidor de los canales de agua, la respuesta de Calcio y la translocación del TRPV4 también se reducen. Los datos presentados sugieren una interacción funcional entre TRPV4 y AQP2 en la detección de la hipotonía y la activación de la respuesta regulatoria.