Mutaciones en el c-MPL en mieloproliferativos: expresión del c-Mpl y vías de señalización JAK/STAT.

KORIN LAURA; GLEMBOTSKY ANA C; LEV PAOLA R; CHAZARRETA CARLOS D; MARTA ROSANA F; MOLINAS FELISA C; HELLER PAULA G

Mar del Plata

Congreso; XIX Congreso Argentino de Hematología; 2009

Sociedad Argentina de Hematología

La identificación de mutaciones en el receptor de TPO, c-MPL, ha comenzado a descifrar la patogenia de los mieloproliferativos JAK2V617F(-). La disminución de la expresión del c-mpl es un marcador molecular de los mieloproliferativos, más frecuente en los JAK2V617F(+), aunque el patrón de expresión en pacientes con mutaciones del c-MPL se desconoce. Analizamos la frecuencia de MPLW515L,W515K y S505N en Trombocitemia Esencial (TE) y Mielofibrosis Primaria (MP) e investigamos sus efectos en la expresión de c-mpl y la vía JAK/STAT. Se detectó MPLW515L en 1/100 (1%) TE y 1/11 MP por PCR alelo específica y secuenciación; JAK2V617F en 49% TE y 2/11 MP; ninguno fue positivo para MPLW515K y S505N. La expresión de c-mpl en plaquetas en el paciente TE c-MPL(+) fue normal por citometría de flujo(c-mpl/isotipo vs control:3.2 vs 3.4) y por Western blot (c-mpl/b3integrina:99% del control); el nivel de ARNm (PCR tiempo real) en pacientes c-MPL(+) fue similar a TE c-MPL(-)(n=20) y no difirió significativamente del control; c-MPL/GAPDH 0.25 y 0.26 en ambos c-MPL(+); 0.24 (0.12-0.97) en c-MPL(-) vs 0.39 (0.21-0.78) en controles, p= 0.1. Hubo leve aumento en los niveles circulantes de TPO (ELISA), 45.8 pg/mL en MPL (+) vs 0 (0-32) pg/mL en controles. No se detectó fosforilación basal de STAT3 y 5 en plaquetas por Western blot y la fosforilacion en respuesta a concentraciones crecientes de TPO no difirió del control, reflejando ausencia de activación constitutiva del receptor y de hipersensibilidad a su ligando, contrastando con lo observado en modelos experimentales. La baja frecuencia de mutaciones c-MPL concuerda con la literatura, ilustrando la necesidad de hallar nuevas mutaciones en pacientes JAK2/c-MPL(-). Los niveles normales de c-mpl indican que la mutación MPLW515L no induce una desregulación en su expresión, a diferencia de lo observado en mieloproliferativos JAK2V617F, sugiriendo una relación entre la expresión del c-mpl y la alteración genética subyacente.