Análogos estructurales del cristal violeta inhiben el transportador de prolina TcAAAP069 de Trypanosoma cruzi y presentan actividad tripanocida

VALERA-VERA, EDWARD; MIRANDA, MARIANA; GAUNA, LUCRECIA; PEREIRA, CA; SAYE, MELISA; REIGADA, CHANTAL

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

Sociedad Argentina de Protozoología (SAP)

La enfermedad de Chagas, cuyo agente etiológico es el parásito protozoario Trypanosoma cruzi, es una zoonosis que afecta alrededor de 7 millones de personas en América Latina. El cristal violeta (CV) se utilizó durante muchos años como aditivo en bancos de sangre para prevenir la transmisión de la enfermedad por transfusiones sanguíneas. Uno de los mecanismos de acción reportado para el CV en T. cruzi involucra la inhibición de la captación de prolina. Además de ser un aminoácido relevante dado que constituye una fuente de carbono y energía alternativa a la glucosa, en T. cruzi, la prolina también es importante no sólo para el crecimiento sino también para la diferenciación entre estadios y la patogénesis. La permeasa de prolina TcAAAP069 pertenece a la familia de transportadores de aminoácidos y derivados TcAAAP, y constituye no sólo un interesante blanco terapéutico sino también una posible vía de ingreso de fármacos tripanocidas. En este trabajo se utilizó el CV como molécula de referencia en un virtual screening para identificar fármacos aprobados para uso clínico estructuralmente parecidos al CV con efecto biológico similar y menor toxicidad. Primero se validó el CV como inhibidor del transportador TcAAAP069 utilizando parásitos salvajes y parásitos que sobre-expresan la permeasa TcAAAP069 tanto en ensayos de transporte como de crecimiento. Luego se aplicó una estrategia in silico de virtual screening usando como referencia el CV y se identificaron la olanzapina (OLZ, antipsicótico), la clofazimina (CFZ, antibiótico), la loratadina y la ciproheptadina (LTD y CPH, ambos antihistamínicos). Las cuatro drogas inhibieron el transporte de prolina y presentaron IC50s con valores entre 9 y 120 µM para los epimastigotes y entre 2 y 55 µM para los tripomastigotes de la cepa Y de T. cruzi. Además, CFZ, LTD y CPH tuvieron acción tripanocida en epimastigotes de las cepas CL Brener y en DM28c con IC50s en rangos similares a la cepa Y. Por último, se observó un efecto sinérgico entre el benznidazol y una mezcla de estos tres análogos del CV, evidenciado por los índices de combinación y de reducción de dosis. En conclusión, estos resultados sugieren que los análogos del CV LTD, CPH y CFZ son interesantes puntos de partida para el desarrollo de tratamientos alternativos contra la enfermedad de Chagas.