Efecto facilitador de CGS-21680C sobre la secreci¨®n colin¨¦rgica en sinapsis neuromuscular de mam¨ªfero

ALEJANDRA G. PALMA; SALOMON MUCHNIK; ADRIANA LOSAVIO

Buenos Aires

Jornada; VIII Jornadas Cient¨ªficas del Instituto de Investigaciones M¨¦dicas Alfredo Lanari; 2009

Instituto de Investigaciones Medicas Alfredo Lanari

Introducci¨®n. La adenosina modula la liberaci¨®n de ACh en sinapsis motoras por activaci¨®n de los receptores A1 inhibitorios y A2A excitatorios presin¨¢pticos. La activaci¨®n de los receptores A2A podr¨ªa producir facilitaci¨®n sin¨¢ptica por diferentes mecanismos: aumentando el influjo de calcio a trav¨¦s de los CCVD presin¨¢pticos (CCVD tipo L, N, P/Q) y/o actuando sobre alg¨²n punto del proceso exocit¨®sico en un paso posterior al ingreso de calcio a la terminal. Objetivos. Nuestro prop¨®sito fue aclarar el/los mecanismo/s de facilitaci¨®n presin¨¢ptica inducida por el agonista A2A CGS-21680 (CGS) sobre la liberaci¨®n de ACh en distintas situaciones experimentales. Materiales y M¨¦todos: En m¨²sculos diafragmas de ratones CF1 se registraron frecuencia (f) de potenciales de placa miniatura (MEPPs) en soluci¨®n isot¨®nica e hipert¨®nica y en preparaciones incubadas en alto K+ mediante t¨¦cnicas convencionales con microelectrodos. Resultados. La incubaci¨®n con el quelante de Ca2+ intracelular BAPTA-AM ocluy¨® el efecto facilitador de CGS: Soluci¨®n isot¨®nica: fMEPPs 0Ca2+-BAPTA-AM 25.4¡À2.4% del control, 0Ca2+-BAPTA-AM+CGS 26.9¡À1.7% (n=5) y soluci¨®n hipert¨®nica (SH): 0Ca2+-BAPTA-AM pico curva 22.9¡À3.8%, ¨¢rea curva 22.0¡À2.1%, 0Ca2+-BAPTA-AM+CGS pico 22.6¡À7.0%, ¨¢rea 25.8¡À2.3% (n=5). La elevaci¨®n de [Ca]i puede deberse al influjo de Ca2+ desde el espacio sin¨¢ptico o su liberaci¨®n desde los dep¨®sitos intracelulares. La incubaci¨®n en 0Ca2+-EGTA no ocluy¨® el efecto de CGS en condiciones isot¨®nicas ni hipert¨®nicas, pero la depleci¨®n de los dep¨®sitos de Ca2+ intracelulares con tapsigargina (TG) previno la modulaci¨®n de CGS: fMEPPs TG 94.2¡À6.2%, TG+CGS 104.9¡À6.1% (n=4); SH TG pico 95.7¡À5.0%, ¨¢rea 87.8¡À5.2%, TG+CGS pico 93.0¡À2.9%, ¨¢rea 92.2¡À10.3% (n=4). Los experimentos realizados en 15 mM K+ mostraron que el efecto de CGS (¡üfMEPPs ~60%) no fue observado en presencia de TG (fMEPPs K+15: Control 626.7¡À60.9% de RN, TG 577.8¡À14.6%, TG+CGS 515.7¡À18.5%, n=4) ni del bloqueante de los CCVD tipo-L nitrendipina (NIT): Control 510.1¡À18.1%, NIT 522.8¡À39.4%, NIT+CGS 483.6¡À37.0%, n=3. El inhibidor de los CCVD tipo-P/Q ¦Ø-Agatoxina IVA no modific¨® la acci¨®n de CGS. Conclusiones: Los resultados sugieren que la activaci¨®n de los RA2A facilita la liberaci¨®n espont¨¢nea de ACh incrementando el Ca2+ liberado desde los dep¨®sitos intracelulares. La modulaci¨®n de la liberaci¨®n asincr¨®nica de ACh inducida por K+ se deber¨ªa a la movilizaci¨®n de Ca2+ desde los dep¨®sitos internos y desde el espacio sin¨¢ptico a trav¨¦s de los CCVD tipo-L.