Avances en el estudio de transportadores de aminoácidos de Trypanosoma cruzi: Análisis de la expresión y la conservación génica de TcPAT9

CANEPA, GASPAR; CARRILLO, CAROLINA; MIRANDA, MARIANA; BOUVIER, LEON; PEREIRA, CA

Buenos Aires

Jornada; VI Jornadas científicas del instituto de investigaciones medicas Alfredo Lanari; 2007

INTRODUCCIÓN: En los genomas de los parásitos protozoarios Trypanosoma cruzi, Trypanosma brucei y Leishmania major se han identificado una gran variedad de familias multigénicas de transportadores de metabolitos. Estos genes codifican para sensores moleculares del medio extracelular y son cruciales para regular diferentes procesos metabólicos durante los estadios de su ciclo de vida de estos tripanosomátidos. Nuestro laboratorio caracterizó diferentes miembros de la superfamilia AAAP (permeasas de aminoácidos y auxinas) en Trypanosoma cruzi. Cabe resaltar que el estudio de esta familia de transportadores es particularmente interesante ya que se encuentra totalmente ausente en mamíferos y por lo tanto constituyen potenciales blancos terapéuticos tripanocidas. OBJETIVOS: El objetivo de este trabajo es continuar la caracterización de un transportador de aminoácidos de T. cruzi, denominado TcPAT9. Principalmente generar las herramientas que permitan analizar la expresión de TcPAT9 por técnicas inmunológicas y el análisis de su organización génica comparativa respecto a otros parásitos de importancia sanitaria. MATERIALES y METODOS: Para caracterizar la expresión de TcPAT9 se produjeron anticuerpos específicos en ratones y se analizó su expresión mediante la técnica de Western Blot. El análisis genómico se llevó a cabo utilizando programas bioinformáticos y la base de datos de los genomas de dichos parásitos. RESULTADOS y CONCLUSIONES: Se determinó que TcPAT9 presenta 11 pasos de transmembrana con un peso molecular de 49.7 kDa y es la mejor candidata a ser la ortóloga del transportador de arginina de Leishmania donovani LdAAP3. Se expresaron diferentes péptidos internos de la proteína y se utilizaron para producir anticuerpos específicos. Se analizó la expresión de TcPAT9 mediante Western Blot en diferentes condiciones del medio y durante el ciclo de vida del parásito. La organización génica de TcPAT9 presenta una sintenia conservada con T. brucei, pero no así con el parasito L. major sugiriendo la acción de mecanismos de reestructuración y eventos de transposición-duplicación a lo largo de su evolución.