Perfil mutacional y análisis de expresión del gen ptch1 en pacientes con síndrome de carcinoma basocelular nevoide (SCBCN)

MARTÍNEZ M; MAZZUOCCOLO L; PANELO L; GONZALEZ A; RUBIO M; MUCHNIK C; STENGEL F; AZURMENDI P

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión SAIC; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínicas

El Síndrome de carcinoma basocelular nevoide (SCBCN) esuna enfermedad autosómica dominante cuyo principal gen causales PTCH1, el receptor clave en la vía de señalización Hedgehog(Hh). Previamente, mostramos el primer informe nacional sobre lasmutaciones en PTCH1 en pacientes SCBCN y su participación enla tumorigénesis de los carcinomas basocelulares (CBCs) que desarrollan.El presente trabajo tiene por objeto ampliar dicho estudio yanalizar la expresión del mRNA de PTCH1 considerando el estatusgenético. Para ello, se completó la búsqueda de mutaciones porPCR-secuenciación bidireccional y Multiplex Ligation Probe Amplification(MLPA) de PTCH1 en CBCs y sangre periFerica de 16pacientes. Para la cuantificación por PCR en tiempo real del mRNAde PTCH1 se extrajo RNA total para la obtención de cDNA de CBCsy tejido normal (TN) de 15 pacientes, utilizando mRNA de GAPDHcomo gen de referencia; el resultado se expresó como la tasa decambio [2-(CtPTCH1 ? CtGAPDH)]. El MLPA mostró una deleción de un alelocompleto en un CBC con mutación germinal conocida que, sumadoa 3 deleciones, 2 inserciones, 1 duplicación y 4 sustituciones definieronel espectro completo de mutaciones en PTCH1, identificando 8mutaciones germinales y 5 somáticas (sólo en CBC). Los resultadosmuestran que PTCH1 es el responsable del SCBCN en 8/16 de lospacientes y que el 50% de los mismos evidencia el mecanismo detwo-hit en CBC. El mRNA de PTCH1 en CBCs aumentó 30,2 ±8,2veces respecto del TN (p<0.001), consistente con la activación de lavía Hh al ser un gen blanco de la misma. En TN de pacientes conmutaciones germinales en PTCH1, la expresión fue más alta que enlos que no las portaban (6,7x10-4 ±1,2x10-4, n=8 vs 3,1 x10-4 ±0,9x10-4, n=7; p<0,05). El análisis mutacional sugiere que otros genescausales estarían involucrados en el SCBCN. En este sentido, elperfil de expresión génica encontrado apuntaría a genes relacionadosa la regulación de la vía Hh como posibles candidatos.