Caracterización de la corriente estimulada por aldosterona en una línea celular de placenta humana (Bewo)

DEL MÓNACO S., ASSEF Y. Y KOTSIAS BA.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LI Congreso Anual de SAIC; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En estudios previos detectamos la expresión del canal epitelial de sodio sensible al amiloride y estimulado por aldosterona (ENaC) en la línea celular BeWo derivada de placenta humana. El objetivo de este trabajo es caracterizar la corriente transportada por ENaC en dichas células mediante la técnica electrofisiológica de patch clamp en su configuración de célula entera. Las células BeWo cultivadas con aldosterona (100 nM, 12 h) evidenciaron un incremento significativo de las corrientes iónicas entrantes luego de la aplicación de 8-Br AMPc (100 mM, 25 min), con una densidad de conductancia de 165.5 ± 44.9 pS/pF (entre -40 y –140 mV) y un corrimiento significativo del potencial de reversión (Er) de –19.9 ± 18.3 mV a 4.2 ± 7.6 mV (p £ 0.0001, n = 20). El reemplazo del Na+ extracelular por cantidades equimolares de NMDG produjo una reducción de la corriente en un 55 ±  30 %  (a –140 mV) y el retorno del Er a un valor de –33.5 ± 7.1 (p < 0.001, n  = 7). Con el reemplazo del Na+ extracelular por K+ se mantuvo la intensidad de corriente y el Er (8.8 ± 5.2 mV, n = 6). El reemplazo por Li+ no produjo modificaciones en la corriente activada ni corrimiento del Er (7.0 ± 4.5 mV, n  = 7). La corriente sensible al amiloride (10 mM) observada en solución extracelular de Na+, K+ y Li+ presentó una conductancia de 47.9 ± 14.9, 16.7 ± 9.3 y 70.5 ± 26.6 pS/pF, respectivamente. Los coeficientes de permeabilidad relativa fueron de 0.2 para PNMDG/PNa, 0.6 para PK/PNa y 1.3 para PLi/PNa indicando una relación de permeabilidad decreciente: Li, Na, K, NMDG.             Nuestros resultados indican que en las células BeWo la aldoterona estimula una corriente tipo ENaC con características similares a las que presenta el canal en otros tejidos. La reactividad de las células de placenta a la aldosterona sugiere la importancia del transporte de sodio también en el trofoblasto humano y de la regulación que podría efectuar la hormona en el mismo.