Las l-asparaginasas de Trypanosoma cruzi como alternativa terapeutica en la leucemia linfoblastica aguda

DIGIROLAMO F; MIRANDA MR; CANEPA GE; CAMARA MM; PEREIRA CA

CABA

Jornada; XI Jornadas Científicas del Instituto Lanari; 2012

En la actualidad existe una necesidad de encontrar nuevas L-asparaginasas eucariotas para ser usadas como alternativas terapéuticas más eficaces que la de E. coli, utilizada en el tratamiento en leucemias y linfomas. Estudiando el metabolismo de aspartato en Trypanosoma cruzi, el agente etiológico de la Enfermedad de Chagas, se detectaron dos genes de posibles L-asparaginasas en su genoma. Estos genes fueron clonados y expresados con el objetivo de analizar sus propiedades fisicoquímicas y biológicas. Los dos genes, denominados TcNasa-1 y TcNasa-2, codifican para proteínas de 54.6 y 43.3 kDa de peso molecular, con puntos isoeléctricos notablemente diferentes, 5.8 y 8.6 respectivamente. Estas proteínas poseen una identidad de secuencia de sólo el 22% en aminoácidos entre sí y ambas tienen una escasa similitud con las L-asparaginasas denominadas tipo I bacterianas, cuya localización es citosólica. TcNasa-2 fue expresada en E. coli con un alto rendimiento de 0.5 gr/litro de fermentación y fue purificada con una técnica sencilla, con un rendimiento del 50%. Su actividad enzimática fue verificada y se estudiaron sus propiedades bioquímicas. El pH óptimo fue determinado en 5 y su Km y Vmax fueron calculadas en 10.7 μM y 30.3 μmol/min.mg, respectivamente. Además, TcNasa-2 posee una actividad glutaminasa residual menor al 1%, lo cual es significativo si se compara con el 5-10 % de las asparaginasas bacterianas. En este momento se está evaluando el efecto de la TcNasa-2 en comparación con la asparaginasa comercial de E. coli, sobre un modelo de leucemia en la línea celular K-562. Por último, podemos especular que una L-asparaginasa eucariota de un parasito humano, como T. cruzi, sea menos inmunogénica que los productos bacterianos disponibles en la actualidad, ya que estas últimas producen reacciones de hipersensibilidad, alergia y anafilaxia, llegando en algunos casos a la muerte del paciente. Otro efecto no deseado es la inactivación de la enzima por el sistema inmune en el 60% de los pacientes luego de varias aplicaciones.