Vías intracelulares asociadas a la activación de los receptores de adenosina A3 en sinapsis neuromuscular de mamífero

ALEJANDRO CINALLI; JUAN GUARRACINO; ADRIANA LOSAVIO

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión SAIC; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En trabajos anteriores encontramos que en sinapsis neuromuscular (SNM) de ratón la inosina (IN, 100 µM), metabolito de adenosina (AD), es capaz de inhibir presinápticamente la liberación espontanea y evocada de ACh al activar receptores (R) AD A3. Nuestro objetivo fue investigar los mecanismos de transducción intracelular involucrados en la acción de IN sobre la secreción de ACh. En diafragmas de ratones CF1 se estudió el efecto de IN sobre la frecuencia de potenciales de placa miniatura (fMEPPs) y amplitud de potenciales de placa (aEPPs) en presencia de antagonistas de diferentes vías de señalización. Los resultados demuestran que los RAD A3 están acoplados a proteína Gi/o, ya que NEM (desacopla proteína Gi/o del receptor) abolió el efecto inhibitorio de IN (NEM 125.713.9% respecto al control, NEM+IN 123.86.6%, n=5). Cuando investigamos la vía intracelular asociada a la activación de estos R encontramos que el inhibidor de PKA H-89 no previno el efecto de IN sobre la fMEPPs (H-89 101.85.0% respecto al control, H-89+IN 67.95.0%, p0.05, n=4), mientras que el inhibidor de PKC queleritrina (QL) ocluyó su acción (QL 102.79.3%, QL+IN 105.910.7%, n=4). Además, el inhibidor de calmodulina (CaM) W-7 previno la modulación inducida por IN (W-7 97.81.7%, W-7+IN 97.67.5%), pero esta acción fue independiente de la fosforilación provocada por CaMKII; su inhibidor KN-62 no modificó el efecto de IN (KN-62 104.47.9%, KN-62+IN 68.04.9%, p0.05, n=4). Consistente con estos resultados, el efecto de IN sobre aEPPs, también fue abolida por QL y W-7, pero no por H-89 y KN-62 (QL 102.99.8% respecto al control, QL+IN 109.39.2%, n=4; W-7 107.49.1%, W-7+IN 101.48.9%, n=4; H-89 92.90.9%, H-89+IN 63.42.4%, p0.05, n=4; KN-62 108.79.9%, KN-62+IN 69.18.5%, p0.05, n=4). Estos resultados sugieren que, en SNM de mamífero, la IN activa RAD A3 que están acoplados a proteína Gi/o y que PKC y CaM podrían estar involucradas en la acción moduladora de IN sobre la liberación de ACh.