Canal regulador de la fibrosis quística (CFTR) en células BeWo de trofoblasto humano, y su relación con el canal epitelial de sodio ENaC.

MARINO, GI; KOTSIAS, BA

Mar del Plata

Congreso; LVII Annual Scientific Meeting de la SAIC y LX Anual Meeting de la SAI; 2012

Socieda Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y Sociedad Argentina de Inmunología (SAI)

El canal epitelial de sodio sensible al amiloride (ENaC) está presente y es funcional en la línea celular BeWo derivada de trofoblasto humano. En numerosos epitelios, el ENaC presenta una compleja regulación por el canal de cloruro CFTR, también expresado en placenta humana. Nuestro objetivo fue estudiar si el CFTR es funcional en células BeWo, y si su activación afecta la expresión y/o actividad del ENaC en estas células. Utilizamos técnicas electrofisiológicas (patch clamp, configuración célula entera) y de biología molecular. Por RT-PCR del canal CFTR observamos la banda esperada a ~295 pb y por Western blot la banda típica de ~160 KDa. Para inducir la activación del CFTR estimulamos las células con forskolina (20 µM, 3 min.), un activador de la adenilato ciclasa, y registramos una corriente neta con una conductancia saliente de 32.5 ± 0.8 pS/pF, y entrante de 20.1 ± 0.8 pS/pF. La corriente se inhibió con el inhibidor específico de CFTR, tiazolidona CFTRinh-172 (2 µM): conductancia saliente: 14.9 ± 0.7 pS/pF, y entrante: 14.3 ± 0.2 pS/pF (n=4, p