El canal de sodio sensible al amiloride (ENaC) participa en la migración de células BeWo de trofoblasto humano

MARINO GI.; ASSEF YA.; KOTSIAS BA.

Buenos Aires

Congreso; XXIX Congreso Internacional de Obstetricia y Ginecología-SOGIBA; 2011

Sociedad de Obstetricia y Ginecología de Buenos Aires

El ENaC pertenece a las degenerinas, una superfamilia que codifica proteínas de procesos biológicos como la nocicepción, sentido del gusto salado y táctil, homeostasis del Na+ y mecanotransducción. Tres subunidades homólogas alfa, beta y gamma forman el poro por el cual se mueven los iones. La regulación del ENaC es compleja y la aldosterona como los estrógenos y la progesterona regulan la expresión del ENaC con cambios en la expresión en la cara apical de las células, en el tráfico de las subunidades hacia la membrana celular y en la probabilidad de apertura del canal. Las proteasas escinden zonas específicas del ENaC y lo activan. El mal funcionamiento del ENaC es evidente en enfermedades como el pseudohipoaldosteronismo tipo I, síndrome de Liddle, edema pulmonar y la fibrosis quística en la que además del transporte anómalo del canal CFTR, una parte importante del cuadro sintomatológico se debe a una falta de regulación del ENaC. La migración celular es crucial en la defensa inmunológica, la morfogénesis embrionaria, la reparación de heridas, la regeneración de los tejidos y su alteración podría estar implicada en la fisiopatología de la preeclampsia. La migración es un fenómeno complejo que requiere de la integración de señales mecánicas y químicas que llevan a la represión en la expresión de moléculas de adhesión y a cambios en el volumen y en el citoesqueleto celular y la regulación aberrante de este proceso subyace en la invasión de los tumores malignos. La línea celular BeWo deriva del trofoblasto humano. Con técnicas electrofisiológicas y de biología molecular mostramos que el ENaC se expresa en estas células y es funcional, participando en la migración celular que es estimulada con aldosterona y bloqueada con amiloride. La aldosterona activa en forma rápida al ENaC por la metilación de la subunidad beta mientras que la 3-deaza-adenosina (DZA) inhibe esta reacción. Evaluamos la capacidad migratoria celular utilizando el modelo de relleno de la herida (wound healing) en monocapas de células BeWo, midiendo el % cicatrizado a las 6 h. Las células estimuladas con aldosterona y con aldosterona más AMPc cubren una mayor superficie de las heridas que las cultivadas sin estímulo hormonal, evidenciando que la aldosterona y el AMPc participan en la migración y reparación de la herida, presentando una tendencia a un efecto sinérgico entre aldosterona y AMPc. Observamos un efecto inhibitorio de DZA sobre la cicatrización de la herida en células tratadas con AMPc y aldosterona. Experimentos controles demuestran que cicatrización de la herida depende de la migración y no de la proliferación celular. Para estudiar el probable efecto de la metilación del canal ENaC medimos la corriente sensible al amiloride en células tratadas con aldosterona o aldosterona más DZA. No detectamos corrientes sensible al amiloride significativa con el tratamiento con DZA. La expresión proteica del ENaC no se modifica con DZA. Nuestros resultados indican que los efectos de la aldosterona sobre la migración celular podrían ser explicados en base a su efecto sobre la metilación del ENaC. En base a estas evidencias y otras publicadas por nosotros sugerimos que existe una estrecha relación entre el transporte de sodio y la migración de las células trofoblásticas en placenta humana, implicando que ENaC se expresa en el tejido y participa en estos procesos, siendo activado por la aldosterona mediante distintos mecanismos de acción. Uno de los posibles mecanismos en la preeclampsia sería un defecto en la migración de células trofoblásticas que llevarían a un desarrollo anómalo en las arterias espirales con menor irrigación de la decidua. De este modo nuestros datos podrían relacionarse a este tema